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亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)/用于产气荚膜梭菌的平板计数(GB标准)

HB0256

Sulfite-Polymyxin-Sulphadiazine Agar Base

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250g

hopebio

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亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)介绍：

此产品因标准更新，停止生产，请采购HB0256-2亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶(SPS)琼脂

用途：用于产气荚膜梭菌的平板计数。

添加剂：每瓶需配套添加 12盒 HB0256a 多粘菌素B（1.2mg）和 12盒 HB0256b 磺胺嘧啶钠溶液（12mg）使用，每100mlSPS添加1支HB0256a和1支HB0256b。

成分(g/L)

胰酪蛋白胨	15.0
酵母浸粉	10.0
柠檬酸铁	0.5
亚硫酸钠	0.5
琼脂	15.0
pH值7.0±0.1	25℃

检验原理：胰酪蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；亚硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生，使菌落中心呈黑色；琼脂是培养基的凝固剂；多粘菌素B和磺胺嘧啶钠抑制非梭菌的细菌生长。

用法：

称取本品41.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15分钟，冷却至50℃时，每100ml培养基加入1支多粘菌素B 硫酸盐溶液(1.2mg)和1支磺胺嘧啶钠溶液(12mg)，混匀，倾入无菌平皿，备用。

注：培养基中含少量柠檬酸铁铵，灭菌后可能出现微量沉淀。

产气荚膜菌在亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)上的生长特征：

黑色菌落

亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃厌氧培养24小时。注：回收率计算时，用TSC琼脂做对照培养基。

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

标准名称及标准号

GB 4789.13-2012《食品安全国家标准食品微生物学检验产气荚膜梭菌检验》

适用范围

本标准适用于食品中产气荚膜梭菌的平板计数，包括食品生产加工环节的卫生监测及终产品的微生物检验。SPS琼脂为基础培养基，用于选择性分离和计数产气荚膜梭菌。

核心检测方法

1. 样品稀释后接种于SPS琼脂平板；
2. 厌氧条件下（35℃±1℃）培养18-24小时；
3. 观察黑色菌落并进行确认试验（如革兰染色、动力试验等）。

检出限与定量限

检出限为1 CFU/g（mL），定量限为10-100 CFU/g（mL）。需根据样品稀释度和平板菌落数范围进行结果计算。

质控样品要求

1. 每批次实验需使用产气荚膜梭菌标准菌株（如ATCC 13124）作为阳性对照；
2. 空白对照（无菌PBS）应无杂菌生长；
3. 需验证SPS琼脂的选择性及灵敏度。

关键实验步骤

1. 样品均质后梯度稀释；
2. 接种0.1 mL稀释液至SPS琼脂平板，涂布均匀；
3. 厌氧培养后，计数典型黑色菌落（直径1-3 mm，周围有乳白色浑浊环）。

特别说明

1. SPS琼脂中的亚硫酸盐和多粘菌素可抑制非目标菌；
2. 培养时间超过24小时可能导致菌落过度生长，干扰计数；
3. 疑似菌落需通过生化或分子方法进一步确认。

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