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大肠菌群显色培养基/用于快速、准确检测大肠菌群，培养24小时，大肠菌群显蓝绿色

HB7002

Coliform Chromogenic Medium

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1000ml

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大肠菌群显色培养基介绍：

大肠菌群显色培养基是青岛海博生物公司改良的培养基，用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠菌群的快速检测。大肠菌群显蓝绿色，其它菌显黄色或无色，革兰氏阳性菌被抑制。

成份(g/L)

特殊营养物质	34.55
显色剂	0.35
琼脂	13.0
pH 7.0-7.2 25℃

此配方可以进行改良或增加营养成份以获得最佳的结果。

用法称取本品47.9g，加入1000ml蒸馏水，加热溶解并不停搅拌，煮沸不要超过1分钟。分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟。取1ml制备好的样品液加入直径为9cm无菌平皿中心，倾入冷却至45-50℃培养基约15ml，混匀，凝固后，36±1℃倒置培养18～24h。或冷却至45-50℃时，倾入无菌平皿，琼脂完全凝固后，在超净工作台中开盖吹15-30分钟，去掉培养基表面水汽，加入适当稀释度的样品液1ml，涂布于培养基上，36±1℃培养18～24h。操作步骤 1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液; 2、取样品液1ml加入冷却至45-50℃显色培养基中混匀或涂布于平板上； 3、36±1℃培养18～24h，选用有30～200个菌落的平板，计数平板上出现的典型大肠菌群菌落。大肠菌群典型菌落为蓝绿色，其它细菌为无色或黄色菌落。总大肠菌群=蓝绿色菌落; 4、对可疑大肠菌群菌落可划线接种到营养琼脂平板上，36±1℃培养12-16小时，挑取单菌落做大肠菌群BGLB发酵试验。质量控制 1、外观此干燥培养基的粉末均匀，具有良好的流动性，呈乳白色。制备好的平板呈透明无色固体培养基。 2、微生物试验在 36±1℃培养18～24小时：

质控菌株	ATCC	生长情况	菌落颜色
单增李斯特氏菌	19114	-/+	无色
金黄色葡萄球菌	25923	-/+	无色
大肠杆菌	25922	+++	蓝绿色
沙门氏菌	14028	+++	无色
阴沟肠杆菌	23355	+++	蓝绿色
产气肠杆菌	35029	+++	蓝绿色
弗氏柠檬酸盐杆菌	43864	+++	蓝绿色
肺炎克雷伯氏菌	10031	+++	蓝绿色

方法的局限性 本培养基鉴定大肠菌群，少数情况下可能会出现假阳性，但不会出现假阴性，有时可能需做其它补充试验。典型特征 大肠菌群典型菌落为蓝绿色，其它细菌为无色或黄色菌落。

贮存制备好的平板应立即使用，应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处，保存温度2-8℃，注意避光保存。失效干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。注意此培养基仅供实验室使用。参考文献 1、FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of -glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. J. Food Protection, 51; 402-404 (1988). 2、KILIAN, M. a. BLOW, P.: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidases. Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251 (1976). 3、LE MINOR, L. a. HAMIDA, F. BEN: Advantages de la recherche de la galactosidase sur celle de la fermentation du lactose en milieu complexe dans le diagnostic bact riologique, en particulier des Enterobacteriaceae. Ann. Inst. Pasteur (Paris), 102; 267-277 (1962).

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大肠埃希氏菌ATCC25922 蓝色菌落	混合菌种蓝色菌落与无色菌落

阴沟肠杆菌ATCC23355 蓝色菌落	鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028 无色菌落


产气肠杆菌ATCC35029 蓝色菌落	单增李斯特氏菌ATCC27853 抑制或部分抑制，无色菌落

肺炎克雷伯氏菌ATCC10031 蓝色菌落	弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864 蓝色菌落

金黄色葡萄球菌ATCC25922 抑制或部分抑制，无色菌落

大肠菌群显色培养基微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养18-24小时。注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。

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国家标准解读：《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》

标准名称及标准号	GB 4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》
适用范围	适用于食品中大肠菌群的定量检测，包括固体、液体及半固体样品。
核心检测方法	平板计数法或最可能数（MPN）法，显色培养基可用于快速筛选大肠菌群菌落。
检出限与定量限	平板计数法检出限为1 CFU/g（mL），定量范围为10-1000 CFU/g（mL）。
质控样品要求	需使用标准菌株（如大肠埃希氏菌ATCC 25922）进行培养基验证，并设置阴性对照。
关键实验步骤	1. 样品稀释与接种； 2. 显色培养基倾注与培养（36±1℃, 24±2小时）； 3. 蓝绿色菌落计数与结果计算。
特别说明	显色培养基需经验证符合标准性能，部分干扰菌可能产生相似颜色，需结合生化试验确认。

行业标准解读：《生活饮用水标准检验方法微生物指标》

标准名称及标准号	GB/T 5750.12-2023《生活饮用水标准检验方法微生物指标》
适用范围	适用于生活饮用水、水源水及水处理过程中大肠菌群的检测。
核心检测方法	多管发酵法或滤膜法，显色培养基可用于快速定性或定量检测。
检出限与定量限	滤膜法最低检测量为10 CFU/100 mL，定量结果需结合菌落特征确认。
质控样品要求	每批次检测需包含无菌水空白对照及阳性菌株接种试验。
关键实验步骤	1. 水样过滤或直接接种； 2. 显色培养基培养（36±1℃, 24小时）； 3. 蓝绿色菌落形态学观察与报告。
特别说明	需注意水样浊度对滤膜法的干扰，高浊度样品需进行预处理。

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