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革兰氏染色液试剂盒/用于细菌的革兰氏染色试验

HB8278

Gram Stain Kit

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5ml*8

hopebio

见证书

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革兰氏染色液试剂盒介绍：

试剂盒组成：

组成	别名	规格	配制依据
溶液A	结晶紫染色液	5ml*2	将1.0g结晶紫完全溶解于20ml 95%乙醇，然后与80ml 1%草酸铵水解液混合。
溶液B	碘液	5ml*2	将1.0g碘与2.0g碘化钾混合，然后加少许蒸馏水充分振摇，待完全溶解，再加蒸馏水至300ml。
溶液C	95%乙醇	5ml*2	/
溶液D	沙黄复染液	5ml*2	将0.25g沙黄溶解于10ml95%乙醇中，然后加90ml蒸馏水稀释。

检验原理：

通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此，能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。

用法：

1.涂片经火焰固定，加（结晶紫溶液）溶液A染1分钟，用清水冲去染液。

2.加（碘液）溶液B染1分钟，水洗。

3.加（95%乙醇）溶液C，不时摇动玻片约10-30秒，至无紫色脱落为止，水洗。

4.加（沙黄复染液）溶液D，染1分钟，水洗。

5.干后油镜镜检。阳性菌呈紫色、阴性菌呈淡红色。

革兰氏染色液质控结果：


大肠埃希氏菌O157:H7 ATCC35150	金黄色葡萄球菌ATCC25923

革兰氏染色液试剂盒微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置/℃/培养/小时。

革兰氏染色液试剂盒相关产品：

产品货号	产品名称	产品规格	产品说明及用途
HB0102	月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）Lauryl Sulfate Tryptose Broth	250g	用于大肠菌群,大肠杆菌的测定（GB、SN标准）
HB0105	EC肉汤E.Coli Broth	250g	用于粪大肠菌群、大肠杆菌的测定(GB、SN标准)
HB0110	乳糖胆盐发酵培养基Lactose Bile Broth	250g	用于大肠菌群，粪大肠菌群，大肠杆菌的测定(GB标准)
HB0111	乳糖复发酵培养基Lactose Broth	250g	用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB标准)
HB0112	去氧胆酸盐琼脂（DC）（日本标准）Desoxycholate Lactose Agar	250g	用于大肠菌群固体平板测定
HB0113	MR-VP培养基Methyl Red Voges Proskauer Broth	250g	用于大肠杆菌的甲基红实验和VP实验
HB0114	结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）Violet Red Bile Agar	250g	用于大肠菌群的固体平板检测(GB、SN标准)
HB0116	肠道菌计数琼脂（VRBDA）Violet Red Bile Dextrose Agar	250g	用于肠道菌计数和肠杆菌科鉴别
HB0118	品红亚硫酸钠琼脂Fuchsin Basic Sodium Sulfite Agar	250g	用于饮用水和水源水中总大肠菌群的选择性分离和确证(GB标准)
HB0119	乳糖蛋白胨培养液Lactose Peptone Broth	250g	用于饮用水，水源水中总大肠菌群的测定
HB0126	肠道菌增菌肉汤（EE）EE Broth	250g	用于肠道杆菌科细菌的选择性增菌培养(GB标准)
HB0128	LB肉汤LB Broth	250g	用于细菌增菌培养
HBBD0176-4-200	结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)即用型袋装(200ml)Violet Red Bile Glucose Agar	200ml/袋*10	用于肠杆菌科的分离培养
HB0129	LB营养琼脂LB Nutrient Agar	250g	用于发酵工程、基因工程和分子生物学中大肠杆菌的培养
GB095	苯丙氨酸脱氨酶Phenylalanine Deaminase Medium	20支/盒	用于苯丙氨酸脱氨酶试验(需添加苯丙氨酸指示剂配套使用)
HB8499a	头孢磺啶溶液	1ml*5	每支添加于100ml MUGal肉汤中
HB9305	LB培养基（日本方法）Lactose Broth	250g	用于食品中水中大肠菌群检测
HBIG09-1	HBI克罗诺杆菌生化鉴定条(GB4789.40-2024标准)	5条/盒	用于克罗诺杆菌的生化鉴定(GB4789.40-2024标准)
HB8686a	头孢磺啶钠	1mg*5支/盒	每支添加于200mlHB8686MI培养基中
HB6233-3	中国蓝琼脂培养基（医疗）China Blue Agar Medium	250g	用于革兰阴性细菌的分离培养，不具有微生物鉴别盒药敏鉴别的作用
HB9317a	OFPBL抑菌剂	1ml*5支	每支添加于200ml HB9317 OFPBL琼脂基础中
HB8777-1	BBL液体培养基（不含葡萄糖）BBL Liquid Medium	250g	用于双歧杆菌增菌培养
HB0131-1	Columbia-MUG琼脂培养基Columbia-MUG Agar Medium	100g	用于MUG底物法检测食品中大肠杆菌(SN标准)
HB9283	缓冲MUG琼脂(BMA)Buffered MUG Agar	100g	用于滤膜法中MUG底物检测食品中大肠杆菌(SN标准)
HB0107-13	伊红美蓝琼脂培养基(医疗)Eosin-Methylene Blue Agar Medium	250g	用于肠道致病菌及大肠菌群的分离培养，不具有微生物鉴别和药敏鉴别的作用
HB6238-17	麦康凯琼脂培养基（医疗）MacConkey Agar Medium	250g	用于肠道致病菌的分离培养，不具有微生物鉴别和药敏鉴别的作用
HB0148-2	改良胰蛋白胨大豆液体培养基(mTSB)Modified Trypticase (Tryptic) Soy Broth	250g	用于产志贺毒素大肠埃希氏菌样品制备和增菌
HB9323	含糖牛肉汤琼脂培养基Beef Extract Agar Medium with Sugar	250g	用于粪肠球菌的分离培养
HB0107	伊红美蓝琼脂（EMB）Eosin-Methylene Blue Agar	250g	弱选择性培养基、用于分离肠道致病菌，特别是大肠杆菌(GB、SN标准)
HB8279	Kovacs氏靛基质试剂盒Kovacs Indole Reagents Kit	5ml*2	用于吲哚（靛基质）试验
HB8280	甲基红试剂盒Methyl Red Reagents Kit	5ml*2	用于甲基红试验
HB0131	哥伦比亚MUG培养基Columbia- MUG Medium	250g	用于大肠杆菌的荧光检测(SN标准)
HBPM0107-13	伊红美蓝琼脂培养基平板（医疗）（9cm）	9cm*10个/包	用于肠道致病菌及大肠菌群的分离培养，不具有微生物鉴别和药敏鉴别的作用
HBPM4089-6	沙门志贺氏(SS)琼脂培养基平板（医疗）（9cm）	9cm*10个/包	用于沙门菌和志贺菌的分离培养，不具有微生物鉴别和药敏鉴别的作用
HBPM6233-3	中国蓝琼脂培养基平板（医疗）（9cm）	9cm*10个/包	用于革兰阴性细菌的分离培养，不具有微生物鉴别盒药敏鉴别的作用
HBPM6238-17	麦康凯琼脂培养基（医疗）（9cm）	9cm*10个/包	用于肠道致病菌的分离培养，不具有微生物鉴别和药敏鉴别的作用
HB0135	葡萄糖琼脂Dextrose Agar	250g	用于细菌的综合生化试验
HB0136	Andrade氏糖类肉汤Andrade’s Carbohydrate Broth	250g	用于细菌的糖发酵试验
HB0137	Korser氏枸椽酸盐肉汤Korser Citrate Sodium Broth	100g	用于细菌的枸椽酸盐试验(SN、GB标准)
HB0138	Endo培养基Endo Medium	250g	用于滤膜法测定生活饮用水及其水源水中的总大肠菌群
HB0140	乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸琼脂（LMG）LMG Agar	250g	用于滤膜法检测样品中大菌群和大肠杆菌
HB0143	Tergitol-7琼脂Tergitol-7 Agar	250g	用于大肠菌群的鉴定（WTC标准）
HB0152	A-1培养基A1 Medium	250g	用于水中粪大肠菌群检测
HB8931	MPYG培养基MPYG Medium	250g	用于肠道细菌的培养
HB0161	Les Endo琼脂M-Endo Agar，Les	250g	用于水中大肠菌群滤膜法计数
HB0163	M-TEC琼脂M-TEC Agar	250g	用于水中耐热大肠杆菌滤膜计数
HB0164	现隐肉汤Presence-Absence Broth	250g	用于水中大肠菌群计数
HB0168	心浸液琼脂Brain Heart Infusion Agar	250g	营养丰富，用于培养各种细菌
HB0169	桔汁琼脂(也叫橙血清琼脂 OSA)Orange Serum Agar	250g	用于饮料中耐酸细菌的分离培养
HB0171	EEM培养基EEM Medium	250g	用于致病性肠道菌的增菌培养（日本标准）
HB0172	胰蛋白胨胆盐琼脂Tryptone Bile Agar	250g	滤膜法快速检测水中大肠杆菌和大肠菌群（ISO标准）
HB8516	Elek氏培养基Elek Medium	250g	用于致泻大肠埃希氏菌的毒素测定（GB标准）
HB0143	Tergitol-7琼脂Tergitol-7 Agar	250g	用于大肠菌群的鉴定(NMKL)
HBJ0126	含225ml肠道菌增菌肉汤(EE)均质袋Enterobacteria Enrichment Broth	10个/盒	用于肠道菌的增菌培养(GB标准)
HBPP0110	乳糖胆盐发酵培养基(双料)(内置倒管)瓶装（50ml）Double Lactose Bile Medium	50ml/瓶*10	用于大肠杆菌、粪大肠菌群、大肠杆菌的测定
HB0154-1	MFC肉汤MFC Broth	250g	用于生活饮用水及其水源水中粪大肠菌群测定
HB0154	MFC琼脂MFC Agar	250g	用于粪大肠菌群的滤膜法检测
HB8774a	多粘菌素B 20000IU	1ml/支*5	作为HB8744CAYE培养基的添加剂使用。
HB0104	煌绿乳糖胆盐肉汤（BGLB）Brilliant Green Lactose Bile Broth	250g	用于大肠菌群的确证试验
HB8281	V-P试剂盒Voges-Proskauer Reagent	5ml*4	用于V-P试验
HB8507-1	PBS缓冲液（pH7.3）PBS	250g	用于样品制备的稀释剂
HBY8308	MEE肉汤MEE Broth	250g	用于肠道菌的选择性增菌培养(SN标准)
HB8675	TTC乳糖琼脂Lactose TTC agar	250g	滤膜法检测水中大肠杆菌和大肠菌群
HB8686	MI培养基MI Medium	1000ml	用于滤膜法计数饮用水中大肠埃希氏菌和大肠菌群
HB5199	胆盐乳糖增菌液Bile Lactose Enrichment Broth	250g	用于肠道菌的增菌培养
HB0116-2	结晶紫中性红胆盐肉汤Neutral Red-bile Salt Peptone Glucose Medium	250g	用于肠道菌增菌培养
HB0112-1	大肠菌群培养基（日本）Coliform Medium（Japan）	250g	用于大肠菌群的固体平板检测
HB8536-1	艾格LT100肉汤	250g	用于化妆品中好氧菌的增菌培养
HB0108-2	营养肉汤（日本标准）Nutrient Broth（Japan）	250g	用于一般细菌培养、转种、复壮、增菌等
HBDC002	SOC培养基SOC Medium	250g	用于基因工程菌大肠杆菌培养
HB0141-1	茜素-β-半乳糖苷肉汤（Aliz-gal肉汤）Aliz-gal Broth	100g	用于食品中大肠菌群快速检测
HB0109-6	营养琼脂（琼脂20g）Nutrient Agar（Agar 20g）	250g	用于样品中菌落总数的计数
HB0113	MR-VP培养基Methyl Red Voges Proskauer Broth	250g	用于大肠杆菌的甲基红实验和VP实验
HB0158	去氧胆酸盐枸橼酸盐乳糖蔗糖琼脂DCLS Agar	250g	用于沙门氏菌和志贺氏菌的分离培养
HB8517	Honda氏产毒肉汤Honda Toxin-Producing Broth	250g	用于致泻大肠埃希氏菌的产毒培养
HB7001	大肠杆菌显色培养基E. coli Chromogenic Medium	1000ml	用于大肠杆菌的显色快速培养
HB7002	大肠菌群显色培养基Coliform Chromogenic Medium	1000ml	用于快速、准确检测大肠菌群，培养24小时，大肠菌群显蓝绿色
HB8562	MSA培养基MSA Medium	250g	用于肠球菌，轻型链球菌和唾液链球菌分离培养
HB0108-3	营养肉汤（GB/T20944.1-2007纺织品标准）Nutrient Agar	250g	一般细菌培养，转种，复壮，增菌等，也可用于消毒效果检测
HBPT8621-1	磷酸盐缓冲液管（PBS pH7.2）（9ml）	9ml*20支/盒	用于菌落总数，大肠菌群，金葡菌，大肠杆菌样品制备
HB8720	ModifiedSclohtens’Broth(MSB)Modified Sclohtens’ Broth	250g	用于阴沟肠杆菌的培养
HB8722	葡萄糖肉汤Dextrose Broth	250g	用于营养苛求菌培养和肠道菌产气实验
HB8726	最小肉汤培养基the Smallest Broth Medium	250g
HBPT020	EC肉汤管（含小倒管）（9ml）	9ml*20支/盒	用于粪大肠菌群、大肠杆菌的测定
HB8720	ModifiedSclohtens’Broth(MSB)Modified Sclohtens’ Broth	250g	用于阴沟肠杆菌的培养
HB0169	桔汁琼脂(也叫橙血清琼脂 OSA)Orange Serum Agar	250g	用于饮料中耐酸细菌的分离培养
HBDC006	HB-PET自诱导培养基HB-PET Auto-Indection Medium	250g	用于基因工程菌大肠杆菌自诱导蛋白表达培养
HB0138-2	M-远藤氏培养基M-Endo Medium	250g	用于滤膜法检测水中大肠菌群
HB8774	CAYE培养基CAYE Medium	250g	用于致病性大肠埃希氏菌的产毒培养
HB8773	接种测试微生物琼脂培养基Medium Ⅱ(for Transferring the Test Organism)	250g	用于抗生素效价测定
HB8772	菌种和底层琼脂培养基Medium I(foe Seed and Basal Layer)	250g	用于抗生素效价测定的底层培养基或菌种活化
HB0102-3	双料月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）Double Lauryl Sulfate Tryptose Broth	250g	用于大肠菌群,大肠杆菌的测定（GB、SN标准）
HB8797	消毒液中和肉汤Disinfectant Neutralization Broth	250g	用于中和醇类、酚类消毒剂、含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂、季铵盐类消毒剂、醛类消毒剂等
HB8798	卵磷脂吐温稀释液Lecithin polysorbate(LP)diluent	250g	用于样品制备水稀释
HB0152	A-1培养基A-1 Medium	250g	用于水中粪大肠菌群检测
HB8807	M-Endo肉汤M-Endo Broth	250g	用于滤膜法计数水中大肠菌群
HB8808	CCFA琼脂基础CCFA Agar Base	250g	用于艰难梭菌选择性分离培养
HB8774	CAYE培养基CAYE Medium	250g	用于致病性大肠埃希氏菌的产毒培养
HB0114-5k	结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）Violet Red Bile Agar	5kg	用于大肠菌群的固体平板检测(GB、SN标准)
HB0135-2	葡萄糖琼脂Dextrose Agar	250g	用于细菌的综合生化试验，国内常用于肠杆菌科细菌葡萄糖发酵试验
HB0136	Andrade氏糖类肉汤Andrade’s Carbohydrate Broth	250g	用于细菌的糖发酵试验
HB0154-1	MFC肉汤MFC肉汤	250g	用于生活饮用水及其水源水中粪大肠菌群测定
HB5188-2	双料乳糖胆盐发酵培养基Double Lactose Bile Medium	250g	用于大肠杆菌、粪大肠菌群、大肠杆菌的测定
HB8414-2	肠道菌增菌肉汤(USP标准)Mossel-Enterobacteriaceae Enrichment Broth	250g	用于肠杆菌科细菌的选择性增菌培养
HB0116-1	紫红胆盐葡萄糖琼脂（EP7.0标准）Violet Red Bile Glucose Agar	250g	用于肠道菌计数和肠杆菌科鉴别
HB0126-5	肠道菌富集肉汤培养基（USP标准）Enterobacteria enrichment broth-Mossel Medium	250g	用于肠杆菌科细菌的选择性增菌培养（USP标准）
HB8643-1	革兰氏阴性菌增菌液Gram Negative Bacteria Enrichment Broth	250g	用于革兰氏阴性细菌增菌培养
HB8780	大肠杆菌噬菌体MS2液体培养基Coliphage MS2 Liquid Medium	250g	用于大肠杆菌噬菌体MS2培养
HB8782	大肠杆菌噬菌体MS2半固体培养基Coliphage MS2 Medium(Semisolid)	250g	用于大肠杆菌噬菌体MS2培养
HB8806	GAD培养基GAD Medium	250g
HBD0259	阴沟肠杆菌分离琼脂（ECIA）Enterobacter Cloacae Isolation Agar	100g	用于乳及乳制品中阴沟肠杆菌分离培养
HB0177-2	胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）（ISO9038-1-2000）Tryptone Soy Agar	250g	用于大肠杆菌培养
HB0172-1	胰蛋白胨胆盐琼脂（TBA）（ISO9038-1-2000）Tryptone Bile Agar	250g	用于大肠杆菌确证试验
HBKP0126	肠道菌增菌肉汤（颗粒）Enterobacteria Enrichment Broth	250g	用于肠道菌的增菌培养
HB8858	胰化大豆硫酸镁琼脂(TSAM)Tryptic Soy Aagr w/Magnesium Sulfate	250g	用于HGMF膜法培养大肠菌群
HBKP6238-10	麦康凯琼脂培养基（颗粒）（中国药典）MacConkey Agar	250g	用于大肠埃希菌的选择性分离培养
HBPM8686	MI琼脂培养基平板(9cm)MI Medium Plate	9cm*10个	用于滤膜法计数饮用水中大肠埃希氏菌和大肠菌群
HB8520-1	大豆酪蛋白消化物卵磷脂吐温80琼脂培养基（SCDLPA）SCDLPA	250g	用于环境、器皿、设备和表面的无菌检测
HB8528	营养肉汁琼脂Nutrient Agar	250g	用于一般细菌复苏和纯化培养
HBPT0135-2	葡萄糖琼脂斜面管（20支）	20支/盒	用于肠杆菌科细菌葡萄糖发酵试验
HB0126-7	缓冲葡萄糖煌绿胆盐肉汤（EE肉汤）EE Broth	250g	用于肠杆菌科的选择性增菌培养
HB0176-4	结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂（VRBGA）（GB4789.41-2016）Violet Red Bile Glucose Agar	250g	用于肠杆菌科的分离培养
HB6238-4	麦康凯琼脂（不含氯化钠和结晶紫）MacConkey Agar	250g	用于革兰氏阴性菌的分离培养（抑制变形杆菌的漫延）
HBPT8559	EC-MUG培养基管（9ml）EC-MUG Medium	9ml*20支	荧光法检测大肠埃希氏菌
HBPP022-50	50ml三倍乳糖胆盐发酵培养基（内置倒管）瓶装（50ml）50ml Triple Lactose Bile Broth	50ml*20瓶	用于大肠杆菌、粪大肠菌群、大肠杆菌的测定
HBPT0126	30ml肠道菌增菌肉汤管（30ml） 30ml Enterobacteria Enrichment Broth	30ml*20	用于肠杆菌科细菌的增菌培养
HB8304	PW稀释液PW Broth	250g	用于检测肠杆菌时制备样品的稀释液
HB0114-7	结晶紫中性红胆盐-4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷琼脂(VRBA-MUG)VRBA-MUG	100g	用于大肠杆菌酶底物法平板计数
HB0115	西蒙氏枸橼酸盐琼脂Simmons Citrate Agar	250g	用于肠道菌的柠檬酸盐利用试验(GB标准)
HB8643a	青霉素溶液(96IU)	1ml*5支	作为HB8643的添加剂使用
HB0110-4	乳糖胆盐培养液Lactose Bile Broth	250g	用于医疗机构污水和污泥中粪大肠菌群检测
HBBD0114-200	结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA) 即用型袋装(200ml)Violet Red Bile Agar	200ml/袋*10	用于大肠菌群的固体平板检测(GB、SN标准)
HBPT0111	乳糖复发酵管（10ml）Lactose Broth Tube	10ml*20支	用于大肠菌群,粪大肠菌群,大肠杆菌的测定(GB标准)

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标准名称及标准号

GB/T 14926.1-2001 实验动物微生物学检测方法第1部分：细菌学检测通用要求

适用范围

该标准适用于实验动物及其相关样本中细菌的检测，包括革兰氏染色法作为初步鉴定的关键步骤，用于区分革兰氏阳性菌与阴性菌。

核心检测方法

1. 涂片制备：取样本均匀涂布于载玻片并固定；
2. 初染：结晶紫染色1分钟，水洗；
3. 媒染：碘液处理1分钟，水洗；
4. 脱色：乙醇或丙酮脱色至流出液无色；
5. 复染：沙黄或复红复染30秒，水洗干燥后镜检。

检出限与定量限

本标准未明确具体数值，因革兰氏染色为定性试验，结果以菌体染色特性（紫色为阳性、红色为阴性）作为判定依据。

质控样品要求

1. 阳性对照：已知革兰氏阳性菌（如金黄色葡萄球菌）应呈紫色；
2. 阴性对照：已知革兰氏阴性菌（如大肠埃希菌）应呈红色；
3. 空白对照：未染菌载玻片应无染色残留。

关键实验步骤

1. 脱色时间控制：需根据试剂浓度调整，避免过度脱色导致假阴性；
2. 染色均匀性：涂片厚度需适中，防止染色剂分布不均；
3. 镜检条件：使用油镜（100×物镜）观察菌体形态与染色结果。

特别说明

1. 陈旧培养物可能因细胞壁降解导致染色结果异常；
2. 染色试剂需避光保存，有效期内使用；
3. 操作人员需经生物安全培训，废弃染液按危险废物处理。

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