改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素,(mLST-Vm)（颗粒）（袋装）/用于阪崎杆菌选择性增菌培养_培养基_菌种_标准物质_萘析商城

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改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素,(mLST-Vm)（颗粒）（袋装）/用于阪崎杆菌选择性增菌培养

HBKD0102-2

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300ml/袋*10

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改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素,(mLST-Vm)（颗粒）（袋装）介绍：

用途:用于奶粉中坂崎肠杆菌检验时增菌培养。

添加剂：每瓶需配套添加 8盒 HB0102-2a 万古霉素溶液使用。每支万古霉素1mg添加于100mL 改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST-Vm)或克洛诺菌筛选肉汤基础

成分(g/L)

胰蛋白胨	20.0
氯化钠	34.0
乳糖	5.0
磷酸氢二钾	2.75
磷酸二氢钾	2.75
月桂基硫酸钠	0.1
pH值6.8±0.2	25℃

检验原理：

胨胰蛋白胨在培养基中作为营养物质提供菌体细胞生长所需要的氮源、维生素、氨基酸及生长因子等；乳糖提供菌体细胞生长所需要的碳源；氯化钠维持体系渗透压平衡；磷酸盐为菌体生长提供相对稳定的酸碱缓冲体系；月桂基硫酸钠抑制非大肠菌群类细菌的生长。克罗诺杆菌属具有较强的耐渗透压能力和较好的耐热性，且对万古霉素天然耐药，因此使用的改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨（mLST-Vm）肉汤在提供了良好营养的条件下利用高浓度的氯化钠和万古霉素，且在41.5℃±1℃培养，能有效的抑制革兰氏阳性菌和其他不耐渗透压、不耐热的细菌生长。

添加剂

万古霉素（1mg/支）

不同细菌在改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素,(mLST-Vm)上的不同反应

改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素（颗粒）袋装的微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置44±0.5℃需氧培养24±2小时。

月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）原理和使用方法：

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HBKD0128	LB肉汤颗粒LB Broth	300ml/袋*10	用于基因工程菌大肠杆菌培养
HBKD7026	胰蛋白胨大豆琼脂（颗粒）（袋装）TSA Agar	300ml/袋*10	一种通用的营养培养基，用于各种微生物的培养

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GB 4789.40-2024 食品安全国家标准食品微生物学检验克罗诺杆菌检验

适用范围：	婴幼儿配方食品、婴幼儿辅助食品、乳及乳制品及其原料中克罗诺杆菌的检验[1]
核心检测方法：	改良月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤-万古霉素(mLST-Vm)增菌培养后，通过PCR或生化鉴定确认目标菌[1]
检出限与定量限：	最低检出限为0.36 CFU/g，定量限为1 CFU/g（基于10g样品预增菌）[1]
质控样品要求：	每批次实验需设置阳性对照（ATCC 29544菌株）和阴性对照（大肠杆菌ATCC 25922）[1]
关键实验步骤：	样品在36±1℃下进行18-24小时预增菌后，转接至mLST-Vm肉汤进行选择性增菌[1]
特别说明：	万古霉素溶液需现配现用，增菌培养需严格控制温度和时间，避免杂菌过度生长[1]

GB 4789.40-2016 食品安全国家标准食品微生物学检验克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）检验

适用范围：	婴幼儿配方食品、乳和乳制品及其原料中克罗诺杆菌属的检验[1]
核心检测方法：	采用mLST-Vm肉汤进行两阶段增菌（36±1℃培养48小时）[1]
检出限与定量限：	检出限为0.3 MPN/g，定量限为1 MPN/g[1]
质控样品要求：	每20个样品需设置1组空白对照，阳性菌株复苏率需≥70%[1]
关键实验步骤：	样品前处理需在生物安全柜中进行，增菌液pH值需控制在6.8±0.2[1]
特别说明：	强调培养基灭菌后需在24小时内使用，万古霉素添加量需精确至10μg/mL[1]

DB41/T 1590-2018 饲料中阪崎肠杆菌的检测 EMA-PCR法

适用范围：	动物饲料及其原料中阪崎肠杆菌的快速检测[1]
核心检测方法：	结合免疫磁珠富集(EMA)与PCR扩增技术，检测周期缩短至24小时[1]
检出限与定量限：	最低检出限为1 CFU/25g，定量限为10 CFU/g[1]
质控样品要求：	要求每批次检测设置基质对照和过程对照，PCR扩增需包含内参基因[1]
关键实验步骤：	免疫磁珠捕获需在室温下震荡孵育1小时，PCR扩增循环数设定为35次[1]
特别说明：	明确磁珠保存条件为4℃避光，PCR产物需在2小时内完成电泳分析[1]

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