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抗生素检定培养基6号/用于粘菌素等的效价测定

HB5208

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250g

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抗生素检定培养基6号介绍：

用途:用于粘菌素等的效价测定。

成分(g/L)：

蛋白胨	8.0
酵母粉	5.0
牛肉粉	3.0
氯化钠	45.0
磷酸氢二钾	3.3
磷酸二氢钾	1.0
葡萄糖	2.5
琼脂	15.0
pH值7.2-7.4	25℃

检验原理本法是利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用，抑菌圈直径与抗生素的浓度或活性有关;比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小，以测定供试品效价的一种微生物学方法。用法

称取本品 82.8g,加热溶解于 1000ml 纯化水中,分装,115℃高压灭菌 30 分钟,备用。

抗生素检定培养基微生物质控结果：

抗生素检定培养基6号(PH7.2-7.4)微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置35-37℃需氧培养16-18小时。注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。

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一、适用范围

适用于黏菌素等效价及残留的微生物学检定，符合《中华人民共和国药典》2010版四部通则1201微生物检定法要求。该方法通过标准品与供试品的抑菌圈对比，实现抗生素效价测定。

二、核心检测方法

采用琼脂扩散法（管碟法）：将试验菌均匀混入培养基后，加入标准品与供试品溶液，通过测量两者形成的抑菌圈直径差异，计算供试品的相对效价。此方法依赖于抗生素在琼脂中的扩散梯度与浓度相关性。

三、检出限与定量限

依据《中华人民共和国药典》2010版规定，定量限需满足标准品与供试品抑菌圈直径差异在可接受范围内（通常要求RSD≤5%），检出限由试验菌敏感度及培养基成分共同决定，需通过预试验验证。

四、质控样品要求

1. 标准品：需使用国家标定的一级抗生素标准物质，效价已知且批号对应
2. 供试品：溶解后需过滤除菌，浓度梯度设置需与标准品匹配
3. 试验菌：大肠埃希菌（CMCC(B)44103）等规定菌株，菌悬液浓度控制为10⁶~10⁷ CFU/mL

五、关键实验步骤

1. 培养基制备：82.8g干粉溶于1L纯水，115℃灭菌30分钟
2. 双碟制备：分底层（20mL）和菌层（5mL），凝固后打孔
3. 加样：标准品与供试品溶液等量加入孔中
4. 培养：35-37℃需氧培养16-18小时
5. 测量：游标卡尺精确测量抑菌圈直径，取三次测量均值

六、特别说明

1. 实验环境要求百级洁净度，防止杂菌污染
2. 培养基融化需采用水浴或微波加热，禁止直火加热
3. 双碟制备后应在2小时内使用
4. 试验菌传代次数不得超过5代，避免敏感性变化
5. 结果计算采用二剂量法或三剂量法，需符合《药品微生物检验手册》统计要求

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