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含225ml 胰酪胨大豆多粘菌素肉汤均质袋/用于蜡样芽孢杆菌的前增菌培养（GB标准）_
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含225ml 胰酪胨大豆多粘菌素肉汤均质袋/用于蜡样芽孢杆菌的前增菌培养（GB标准）

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含225ml 胰酪胨大豆多粘菌素肉汤均质袋介绍：

用途：用于蜡样芽孢杆菌的前增菌培养（GB标准）。

成分(g/L)：

胰酪胨17.0
植物胨3.0
氯化钠5.0
磷酸氢二钾2.5
葡萄糖2.5
pH值7.3±0.125℃

含225ml 胰酪胨大豆多粘菌素肉汤均质袋微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置30℃需氧培养48±2小时。

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    本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。
    标准名称及标准号
    食品安全国家标准 食品微生物学检验 蜡样芽孢杆菌检验（GB 4789.14-2014）
    适用范围
    本标准规定了食品中蜡样芽孢杆菌的检验方法，适用于各类食品的检测，包括前增菌、分离培养、生化鉴定等步骤。含胰酪胨大豆多粘菌素肉汤的均质袋用于前增菌阶段，以促进目标菌的生长并抑制部分杂菌。
    核心检测方法
    1. 前增菌培养：样品与225ml胰酪胨大豆多粘菌素肉汤均质后，30℃±1℃培养24h±2h。
    2. 选择性增菌：接种至甘露醇卵黄多粘菌素（MYP）琼脂平板，30℃培养24-48h。
    3. 形态学观察：挑取典型菌落进行革兰氏染色和显微镜检查。
    4. 生化鉴定：包括溶血试验、动力试验、硝酸盐还原试验等。
    检出限与定量限
    本标准规定蜡样芽孢杆菌的检出限为1CFU/g（或1CFU/mL），定量限为10CFU/g（或10CFU/mL）。若样品经前增菌后未检出目标菌，需结合培养结果判定为阴性。
    质控样品要求
    1. 阳性对照：使用蜡样芽孢杆菌标准菌株（如ATCC 11778）验证培养基和试剂有效性。
    2. 阴性对照：使用不含目标菌的样品或无菌缓冲液验证无菌操作可靠性。
    3. 培养基质控：每批次培养基需进行无菌试验和生长试验。
    关键实验步骤
    1. 样品处理：无菌操作称取25g样品加入225ml胰酪胨大豆多粘菌素肉汤均质袋，充分均质。
    2. 前增菌培养：均质袋30℃培养24h，观察浑浊度变化。
    3. 平板划线：取增菌液划线接种MYP平板，培养后观察典型粉红色菌落（周围有乳白色沉淀环）。
    4. 纯化培养：挑取可疑菌落进行纯化及生化鉴定。
    特别说明
    1. 多粘菌素B的浓度需严格控制在10万IU/L，避免过度抑制杂菌导致假阴性。
    2. 前增菌时间不得超过26h，防止其他芽孢杆菌过度生长干扰结果。
    3. 实验废弃物需高压灭菌处理，防止生物污染。

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