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阪崎肠杆菌ATCC29544/主要用于阳性对照反应和培养基质量控制等实验

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支

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阪崎肠杆菌ATCC29544介绍：

本品主要用于阳性对照反应和培养基质量控制等实验，广泛运用于食品、药品、化妆品等行业。

产品特色：

1.采用真空冷冻干燥技术，菌株质量稳定，保存时间长，2-8℃保存12个月，-80℃保存24个月以上。

2.配套菌株复苏液和，菌株复活简单，方便。

3.附带完整菌株鉴定报告，安全，放心。

4.瓶身喷码菌种简称及菌号，清晰明了，防止混淆。

阪崎肠杆菌ATCC29544鉴定方法：

冻干菌种复苏接种至TSA平板。菌种活化后划线接种于阪崎显色平板，同时进行革兰氏染色镜检和博检革兰氏阴性细菌鉴定系统生化检测。

阪崎肠杆菌ATCC29544鉴定结果：

TSA平板

黄色透明大菌落

阪崎显色平板

蓝绿色菌落

革兰氏染色镜检

阴性杆菌

博检革兰氏阴性细菌鉴定系统生化检测

阪崎肠杆菌

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一、适用范围

本标准适用于婴幼儿配方食品、乳和乳制品及其原料中克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）的检验，确保食品安全及微生物污染控制[6][9]。

二、核心检测方法

1. 传统培养法：通过选择性培养基（如DFI琼脂）分离目标菌，结合生化鉴定（如L-糖发酵试验、西蒙氏柠檬酸盐试验）确认菌种[6]。
2. 分子生物学方法：包括普通PCR（引物CronoF/CronoR）和荧光定量PCR（引物CronoRTF/CronoRTR及探针），用于快速特异性检测[6][9]。

三、检出限与定量限

1. 传统培养法：检出限为1 CFU/100g（需结合增菌步骤）[6]。
2. PCR法：灵敏度为1.0×10² CFU/mL，可定量检测活菌[5][6]。

四、质控样品要求

1. 质控菌株：使用ATCC 29544标准菌株进行方法验证及实验过程监控[6][9]。
2. 阴性对照：需包含非目标菌（如大肠埃希氏菌ATCC 25922）以排除交叉反应[6]。

五、关键实验步骤

1. 样品预处理：25g样品+225mL缓冲蛋白胨水，均质后36℃±1℃预增菌18-24h[6][9]。
2. 选择性增菌：转种mLST-Vm肉汤，44℃±0.5℃培养22-24h[6]。
3. 分离培养：划线接种DFI琼脂平板，25℃培养48h观察蓝绿色菌落[6]。
4. PCR检测：DNA提取后，95℃预变性5min，35循环扩增（94℃ 30s，60℃ 30s，72℃ 30s）[6][9]。

六、特别说明

1. 荧光PCR法需在独立区域操作以避免气溶胶污染[6]。
2. 死菌干扰：推荐EMA预处理结合PCR，消除死菌DNA导致的假阳性[5][6]。
3. 培养基质量控制：每批次需用标准菌株验证选择性和促生长能力[6][9]。

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