亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)/用于产气荚膜梭菌的平板计数(GB标准)因标准更新，停止生产，请采购HB0256-2_培养基_菌种_标准物质_萘析商城

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亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)/用于产气荚膜梭菌的平板计数(GB标准)因标准更新，停止生产，请采购HB0256-2

HB0256

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250g

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亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)介绍：

此产品因标准更新，停止生产，请采购HB0256-2亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶(SPS)琼脂

用途：用于产气荚膜梭菌的平板计数。

添加剂：每瓶需配套添加 12盒 HB0256a 多粘菌素B（1.2mg）和 12盒 HB0256b 磺胺嘧啶钠溶液（12mg）使用，每100mlSPS添加1支HB0256a和1支HB0256b。

成分(g/L)

胰酪蛋白胨	15.0
酵母浸粉	10.0
柠檬酸铁	0.5
亚硫酸钠	0.5
琼脂	15.0
pH值7.0±0.1	25℃

检验原理：胰酪蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；亚硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生，使菌落中心呈黑色；琼脂是培养基的凝固剂；多粘菌素B和磺胺嘧啶钠抑制非梭菌的细菌生长。

用法：

称取本品41.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15分钟，冷却至50℃时，每100ml培养基加入1支多粘菌素B 硫酸盐溶液(1.2mg)和1支磺胺嘧啶钠溶液(12mg)，混匀，倾入无菌平皿，备用。

注：培养基中含少量柠檬酸铁铵，灭菌后可能出现微量沉淀。

产气荚膜菌在亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)上的生长特征：

黑色菌落

亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃厌氧培养24小时。注：回收率计算时，用TSC琼脂做对照培养基。

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一、适用范围

GB 8538-2022《食品安全国家标准饮用天然矿泉水检验方法》中规定，SPS琼脂基础用于饮用天然矿泉水中产气荚膜梭菌的分离培养及计数检测，适用于食品和水质微生物安全监测[10]。

二、核心检测方法

采用平板计数法：样品经梯度稀释后接种于SPS琼脂平板，通过厌氧培养（36℃±1℃，24h）后观察黑色菌落特征，结合生化鉴定确认产气荚膜梭菌[7][10]。

三、检出限与定量限

• 检出限：1 CFU/g（mL）
• 定量限：10 CFU/g（mL），需保证平板上生长30-300个典型黑色菌落[7][10]。

四、质控样品要求

质控菌株：产气荚膜梭菌标准菌株（如ATCC 13124），需在SPS平板上呈现典型黑色菌落，且阳性对照率应≥95%[7][10]。

五、关键实验步骤

1. 培养基配制：每41.5g干粉溶于1000mL蒸馏水，121℃灭菌15分钟，冷却至50℃后加入多粘菌素B和磺胺嘧啶钠溶液[2][7]。
2. 样品处理：35g样品与0.1%蛋白胨水均质，梯度稀释至10^-6。
3. 接种培养：取1mL稀释液倾注平板，厌氧培养后计数黑色菌落[7][10]。

六、特别说明

• 厌氧环境要求：需使用专业厌氧罐或双层厌氧袋以保证菌落显色（黑色）[10]。
• 显色机制：亚硫酸盐被还原为硫化物，与柠檬酸铁铵反应生成黑色沉淀[2][7]。

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