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溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基（中国药典）/用于绿脓假单胞菌的分离培养（中国药典）

HB5184-31

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250g

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溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基（中国药典）介绍：

青岛海博-关于2025版《中国药典》中“溴化十六烷基三甲铵琼脂”的pH值范围变更详情函点击查看

用途：用于绿脓假单胞菌的分离培养（中国药典）。

成分（g/L）

明胶胰酶水解物	20.0
氯化镁	1.4
硫酸钾	10.0
溴化十六烷基三甲铵	0.3
琼脂	13.6
pH值7.4±0.2	25℃

检验原理：

明胶胰酶水解物提供碳氮源、维生素和生长因子；溴化十六烷基三甲铵为选择性抑菌剂，作为一种季铵盐阳离子去污剂可释放细菌细胞中的氮和磷而抑制非绿脓杆菌的细菌；琼脂是培养基的凝固剂。

作用：

1.营养成分：铜绿假单胞菌分解蛋白质能力较强，而发酵糖类能力较低，在培养基组分中明胶胰酶水解物和甘油为铜绿假单胞菌的生长提供碳、氮源、维生素和生长因子。

2.无机盐：氯化镁和硫酸钾可以促进绿脓菌素的产生，并维持渗透压。

3.选择性培养的原理：溴化十六烷基三甲铵(cetrimide)作为一种季铵盐阳离子表面活性剂，通过改变细菌细胞的通透性，使细菌发生自溶或引起菌体蛋白质变性沉淀，导致细菌死亡，有较强的抑菌作用。铜绿假单胞菌对溴化十六烷基三甲铵有一定的耐受性，因此，被用于铜绿假单胞菌的选择培养。

4.颜色：铜绿假单胞菌生长过程中会产生两种水溶性色素：黄色的荧光素和绿色的绿脓菌素，所以在溴化十六烷基三甲铵琼脂平板上菌落呈黄绿色。

用法：

称取本品45.3g，加热溶解于1000ml纯化水中，加入甘油10ml，煮沸使混合均匀，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，冷至50℃时，倾入无菌平皿，备用。

注：培养基中含少量氯化镁，灭菌后可能出现微量沉淀。

铜绿假单胞菌在溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基上的生长特征：

铜绿假单胞菌在溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基上的生长特征

有绿色色素

溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基（中国药典）微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置30-35℃需氧培养18-72小时。

注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。

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一、适用范围

适用于非无菌产品中铜绿假单胞菌的选择性分离培养，依据《中国药典》通则1106非无菌产品微生物限度检查要求[1][9]。主要用于药品、医疗器械等产品的微生物限度检查。

二、核心检测方法

采用划线接种法，30~35℃培养18~72小时后，通过菌落形态（黄绿色至蓝绿色）及氧化酶试验进行鉴定[9]。培养基中溴化十六烷基三甲铵作为选择性抑制剂，明胶胰酶水解物提供营养[7]。

三、质控样品要求

需同步接种铜绿假单胞菌CMCC(B)10104（生长率0.5~2）及大肠埃希氏菌CMCC(B)44102（G≤1）。质控菌株传代次数不得超过5代，且需验证培养基的选择性和灵敏度[9][7]。

四、关键实验步骤

1. 称取45.3g培养基，加入1L蒸馏水及10mL甘油；
2. 煮沸溶解后121℃高压灭菌15分钟；
3. 冷却至50℃倾注平皿，凝固后划线接种样品；
4. 观察菌落特征并完成氧化酶验证[1][7]。

五、特别说明

1. 需在避光干燥环境下保存，开封后需立即密封；
2. 含抗菌成分的样品需预先中和处理；
3. 培养时间超过72小时可能影响选择性；
4. pH值需严格控制在7.4±0.2[1][7][9]。

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