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培养基R(乳糖亚硫酸盐培养基)/用于产气荚膜梭菌MPN法计数(EP标准)

HB8532

Medium R (Lactose monohydrate sulphite medium)

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250g

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培养基R(乳糖亚硫酸盐培养基)介绍：

用途:用于产气荚膜梭菌MPN法计数。

用法

称取本品20.3g,溶解于1000ml纯化水中,分装 16mm*160mm试管,每管8ml,并加入一支小倒管,121℃高压灭菌15分钟,冷却,4℃ 保存,使用前,水浴加热培养基5min,冷却,在每管中加入过滤除菌的0.5ml焦亚硫酸钠(12g/L)溶液和0.5ml柠檬酸铁铵(10g/L)溶液。

培养基R（乳糖亚硫酸盐培养基）微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置45.5-46.5℃需氧培养24-48小时。

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一、适用范围

乳糖亚硫酸盐培养基（培养基R）主要用于产气荚膜梭菌的确认实验及水中大肠菌群的选择性检测。该培养基通过乳糖发酵反应与亚硫酸盐的显色特性，快速筛选目标微生物[1][5]。

二、核心检测方法

基于目标微生物的乳糖发酵能力，培养基中的亚硫酸盐与代谢产物结合形成显色反应。例如，产气荚膜梭菌在培养基中产生硫化氢，与亚硫酸盐反应生成黑色沉淀；大肠菌群发酵乳糖后形成红色菌落[1][5]。

三、检出限与定量限

检出限通常为1 CFU/g（或mL），定量限根据样品类型调整。例如，食品样品中产气荚膜梭菌定量限需结合稀释法与选择性显色结果确定[1]。

四、质控样品要求

质控样品需包含标准菌株（如产气荚膜梭菌ATCC 13124或大肠埃希氏菌ATCC 25922），并验证显色反应特异性。每批次培养基需进行阳性与阴性对照实验[5]。

五、关键实验步骤

1. 称取20.3g培养基粉末溶解于1L蒸馏水，煮沸灭菌后分装试管；
2. 添加焦亚硫酸钠（12g/L）与柠檬酸铁铵（10g/L）过滤除菌液各0.5mL；
3. 接种样品后于44.5℃±1℃厌氧培养18-24小时，观察显色与产气现象[1][5]。

六、特别说明

1. 焦亚硫酸钠与柠檬酸铁铵需现用现配，避免氧化失效；
2. 灭菌后培养基需当日使用，防止成分分解；
3. 显色结果受pH影响，需确保灭菌后pH为7.4±0.2[1][5]。

[1] 培养基R(乳糖亚硫酸盐培养基)_微生物培养基_Acmec-吉至试剂 [5] 品红亚硫酸钠琼脂培养基(用于大肠菌群的分离与确证，含乳糖发酵指示剂)-百科

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