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琼脂培养基S(R2A琼脂)/用于饮用水中细菌总数的计数(EP标准)

HB0167-1

Agar medium S(R2A)

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250g

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琼脂培养基S(R2A琼脂)介绍：

用途

用于饮用水中细菌总数的计数。

成分（g/L）

月示胨	0.5
酸水解酪蛋白	0.5
酵母浸粉	0.5
可溶性淀粉	0.5
磷酸氢二钾	0.3
硫酸镁	0.024
丙酮酸钠	0.3
琼脂	15.0
葡萄糖	0.5
pH值7.0-7.4	25℃

用法

称取本品15.12克，加热溶解于1000ml纯化水中，分装三角瓶，121℃高压灭菌15分钟，备用。

注：培养基中有少量淀粉和硫酸镁，灭菌后可能会有微量沉淀。

琼脂培养基S上微生物的生长特征：

大肠埃希氏菌

白色菌落

金黄色葡萄球菌

白色菌落

铜绿假单胞菌

有绿色色素

琼脂培养基S（R2A琼脂）微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置30-35℃需氧培养48-120小时。注：回收率计算时，用R2A琼脂做对照培养基。

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一、中国药典2015年版四部（微生物计数法通则1105）

适用范围

适用于纯化水、制药用水等低营养环境中的需氧菌总数测定，验证R2A琼脂培养基对铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌等标准菌株的促生长能力[1][4]

核心检测方法

采用倾注法或涂布法进行需氧菌计数，培养温度为30-35℃，时间不少于5天，通过对比菌落形态与数量评估培养基性能[1][4]

检出限与定量限

菌落计数应达到对照培养基的70%以上，且稀释级间菌落数呈10倍梯度递减，定量限要求回收率在50%-200%之间[1][4]

质控样品要求

使用铜绿假单胞菌（ATCC 9027）和枯草芽孢杆菌（ATCC 6633）作为阳性对照，菌悬液浓度控制在50-100 CFU/mL[1][4]

关键实验步骤

1. 菌悬液制备需经3次传代培养
2. 培养基灭菌后冷却至45-50℃倾注
3. 培养期间每日观察菌落生长状态[1][4]

特别说明

若样品含抑菌成分需中和处理，培养时间可延长至7天以检测受损微生物，同批号培养基需每6个月复验[1][4]

[1] R2A琼脂培养基适用性验证方案-金锄头文库 [4] R2A琼脂培养基适用性检查方案-金锄头文库

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