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琼脂培养基O(Baird-Parker琼脂)(EP标准)/用于金黄色葡萄球菌的分离培养(EP标准)

HB8413

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250g

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见证书

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琼脂培养基O(Baird-Parker琼脂)(EP标准)介绍：

添加剂：每瓶需配套添加5盒 HB4116-1亚碲酸盐卵黄增菌液使用，每95ml琼脂培养基O中添加1支。

用法：

称取本品63.0g，加热搅拌溶解于950ml纯化水中，分装每瓶95ml，121℃高压灭菌15分钟，临用前加热溶化琼脂，冷却50℃左右，与每95ml培养基中加入常温解冻的亚碲酸钾卵黄增菌液5ml，摇匀后倾入无菌平皿。使用前在冰箱贮存不得超过48h。

质量控制和典型特征：

在36±1℃培养45-48小时，金黄色葡萄球菌的单个菌落呈圆形，表面光滑、凸起、湿润，直径2-3mm。灰黑色至黑色，有光滑，常有浅色（非白色）的边缘。周围绕以不透明圈（沉淀）,其外常有一清晰带。

琼脂培养基O(Baird-Parker Agar)(EP标准)微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置30-35℃需氧培养45-48小时。

注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。

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GB/T 23743-2009 饲料中凝固酶阳性葡萄球菌的微生物学检验.Baird-Parker琼脂培养基计数法

适用范围

本标准规定了凝固酶阳性葡萄球菌在固体培养基(Baird-Parker培养基)上、36℃±1℃好氧条件下培养后进行菌落计数的技术要求，适用于饲料中凝固酶阳性葡萄球菌的检测。[1]

核心检测方法

采用Baird-Parker琼脂培养基进行菌落计数，培养条件为36℃±1℃好氧环境，通过典型菌落形态（黑色菌落伴透明圈及浑浊带）确认目标菌。[1]

检出限与定量限

检出限为1 CFU/g，定量限为10 CFU/g（基于标准规定的样品处理及稀释方法）。[1]

质控样品要求

需使用金黄色葡萄球菌标准菌株（如ATCC 25923）作为阳性对照，每批次培养基需进行无菌试验及生长性能验证。[1]

关键实验步骤

1. 样品均质与稀释；2. 选择适宜稀释度接种Baird-Parker琼脂；3. 36℃±1℃培养24-48小时；4. 典型菌落确认（黑色菌落、透明圈直径≥2mm）；5. 凝固酶试验验证。[1]

特别说明

检测结果需结合凝固酶试验确认，仅计数产生典型菌落且凝固酶阳性的葡萄球菌；培养基中需添加亚碲酸钾卵黄增菌剂以增强选择性。[1]

ISO 6888-1:1999/AMD 1:2003 EN 食品和动物饲养材料微生物学计数凝固酶阳性葡萄球菌的水平法第1部分

适用范围

适用于食品和动物饲料中凝固酶阳性葡萄球菌（包括金黄色葡萄球菌）的定量检测，采用Baird-Parker琼脂培养基进行水平法计数。[6]

核心检测方法

通过样品稀释、Baird-Parker琼脂倾注培养、37℃需氧培养48小时后，计数典型菌落并进行凝固酶试验验证。[6]

检出限与定量限

最低检出限为10 CFU/g，定量范围为10-300 CFU/平板（依据修正案1的精确度数据）。[6]

质控样品要求

每批次实验需包含阴性对照（无菌生理盐水）和阳性对照（金黄色葡萄球菌ATCC 6538），培养基需通过性能测试（如生长率≥70%）。[6]

关键实验步骤

1. 样品制备与系列稀释；2. 取0.1mL稀释液涂布Baird-Parker琼脂；3. 37℃培养48小时；4. 典型菌落（黑色带晕轮）计数；5. 凝固酶试验及核酸酶试验补充鉴定。[6]

特别说明

修正案1增加了实验室间比对数据，要求重复性标准偏差≤0.25 log CFU/g，再现性标准偏差≤0.45 log CFU/g；需注意亚碲酸钾的毒性操作防护。[6]

参考资料

[1] GB/T 23743-2009 饲料中凝固酶阳性葡萄球菌的微生物学检验.Baird-Parker琼脂培养基计数法
[6] ISO 6888-1:1999/AMD 1:2003 EN 食品和动物饲养材料微生物学计数凝固酶阳性葡萄球菌的水平法第1部分

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