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荚膜染色液/用于荚膜染色

HB8301

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5ml*4

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荚膜染色液介绍：

荚膜染色液说明书

[规格]：5ml*4

[试剂盒组成]：

溶液A：结晶紫染色液

溶液B：20%硫酸铜水溶液

[使用方法]：

1.涂片：按常规法涂片，可多挑些菌体与水充分混合，并将粘稠的菌液尽量涂开，但涂布的面积不宜过大。

2.干燥：在空气中自然干燥。

3.染色：用溶液A染5-7分钟。

4.脱色：用溶液B洗去结晶紫，脱色要适度（冲洗2遍）。用吸水纸吸干，并立即加1-2滴香柏油于涂片处，以防止CuSO₄结晶的形成。镜检。

[结果观察]：背景无色或浅紫色，菌体紫色，荚膜无色或浅紫色。

[注意事项]：

1.脱色时不可用水冲洗，必须用乙液。

2.不能加热干燥或固定涂片，以避免水冲洗玻片，防止荚膜皱缩或脱失。

检验原理：

荚膜是细菌细胞壁外的一层粘液性多糖类物质，其对染料的亲和力较弱，因此不容易着色，通常采用负染色法染色，让菌体和背景着色而荚膜不着色，从而使菌体周围呈现透明圈。由于荚膜本身含水量较多，质地疏松且单薄，因此在染色的时候不能加热固定，以免荚膜受热皱缩变形。荚膜染色可用于肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、炭疽芽孢杆菌以及产气荚膜梭菌的鉴定。

肺炎链球菌染色结果：

荚膜染色液微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置/℃/培养/小时。

荚膜染色液的使用方法及结果判定：

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1. 适用范围

适用于细菌荚膜的染色观察，特别是科研领域中对肺炎链球菌、炭疽芽胞杆菌等有荚膜细菌的鉴别与分型分析。本方法通过特殊染色使荚膜与菌体呈现明显对比，便于显微镜下观察[1]。

2. 核心检测方法

采用Hiss法（硫酸铜染色法）：
1. 细菌涂片自然干燥后乙醇固定；
2. 滴加Hiss染色液加热至微蒸汽产生；
3. 硫酸铜溶液冲洗后直接干燥镜检。染色后荚膜呈蓝紫色，菌体深蓝色[1][2]。

3. 检出限与定量限

未明确提及具体数值，但要求样本浓度适中。浓度过低可能导致镜下难以识别，建议通过预实验优化涂片厚度及染色时间[1][2]。

4. 质控样品要求

1. 使用已知荚膜阳性的标准菌株（如肺炎链球菌）作为阳性对照；
2. 染色液开封后需在6个月内使用完毕，避免挥发或变质；
3. 存储时避光，室温保存，出现沉淀需过滤或弃用[1][2]。

5. 关键实验步骤

1. 涂片需均匀且厚度适宜，避免过厚影响观察；
2. 加热染色液时需控制温度，避免沸腾导致染色不均；
3. 冲洗步骤仅用硫酸铜溶液，不可用水冲洗；
4. 干燥后优先使用油镜观察以提高分辨率[1][2]。

6. 特别说明

1. 本方法仅限科研用途，不适用于临床诊断；
2. 操作时需避免染色液接触皮肤或黏膜；
3. 染色后需及时观察，长期存放可能导致褪色；
4. 对于新型隐球菌等特殊菌种，建议采用墨汁负染法辅助验证[1][2][5]。

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