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芽孢染色液(改良)/用于芽孢染色

HB8300-2

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5ml*4

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芽孢染色液(改良)介绍：

【产品组成】

溶液A:孔雀石绿水溶液。

溶液B:番红溶液。

【使用方法】

1. 常规涂片，待干燥后，在火焰上过3次以固定。2. 滴加3-4滴A液于已固定的涂片上。3. 用木夹夹住载玻片在火焰上加热 4. 待玻片冷却后，倾去染液，水洗至不再褪色为止。5. 用B液复染1min，水洗至水为无色。6. 待干燥后,至油镜观察。

【结果判定】：芽孢呈绿色,菌体呈红色。

【注意事项】：加热过程不能使之沸腾，并且不能蒸干。

芽孢染色镜检图：

芽孢染色实验操作视频：

芽孢染色液的原理及使用方法：

芽孢染色液（改良）微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，

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GB/T 41727-2022《农用微生物菌剂功能评价技术规程》解读

适用范围
本标准适用于农用微生物菌剂的功能评价，包括提供和活化养分、促进作物生长、土壤改良、修复及有机物料腐熟等场景中微生物菌剂的检测与评价[9]。

核心检测方法
采用微生物染色法（如芽孢染色）结合显微镜观察，评估菌剂中特定微生物的活性与功能。染色方法需符合标准中规定的加热固定、梯度脱色及复染流程[9]。

检出限与定量限
未明确具体数值，但要求染色后的显微观察需达到芽孢与菌体颜色对比显著（芽孢呈红色/绿色，菌体呈蓝色/红色），且至少检出10^4 CFU/g有效活菌数。

质控样品要求
菌剂样品需含明确标注的芽孢形成菌种（如枯草芽孢杆菌），菌龄控制在大部分芽孢未脱离菌体的阶段，避免过度老化或新生菌体干扰染色结果[9]。

关键实验步骤
1. 涂片固定：菌体均匀涂布载玻片，火焰加热固定；
2. 加热染色：滴加染色液（如孔雀绿或石炭酸复红），微火加热至冒蒸汽但不沸腾，维持3-5分钟；
3. 梯度脱色：95%酒精冲洗至无染液脱落，水洗；
4. 复染：碱性美蓝或番红复染1-2分钟，水洗干燥后镜检[9]。

特别说明
1. 加热过程中需严格控制温度，避免沸腾导致菌体破裂或染液蒸干；
2. 染色结果需由两名实验员独立验证，确保芽孢与菌体颜色区分明确；
3. 实验人员需穿戴防护装备，避免接触有毒染液[9]。

[9] GB/T 41727-2022《农用微生物菌剂功能评价技术规程》

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