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萋-尼氏染色液/用于细菌抗酸染色

HB8284

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5ml*6

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萋-尼氏染色液介绍：

用途：用于细菌抗酸染色

组成：

溶液A（碱性复红0.3g、溶解于95%酒精 10ml、加 5%石炭酸90ml）：5ml*2

溶液B（3%盐酸酒精）：5ml*2

溶液C（美蓝0.3g、95%酒精 30ml、0.01%氢氧化钾100ml）：5ml*2

使用方法：

1.涂片火焰固定，平放染色架上。

2.加入溶液A盖满涂膜，微火加温至染液呈现蒸汽，去火焰，染色5min（勿使染液呈现干涸），水洗。

3.加入溶液B，脱色 1-3min，至无红色，水洗。

4.加入溶液C复染 30s-1min，水洗，干后，镜检。

结果观察：

抗酸菌呈红色杆菌，其它细菌和细胞呈蓝色。

草分枝杆菌染色结果：

萋-尼氏染色液微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置/℃/培养/小时。

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一、适用范围

主要用于结核病（如肺结核）的病原学诊断，适用于痰液、胸水、腹水、脑脊液等临床样本中分枝杆菌及诺卡菌等抗酸菌的检测[1][10]。该方法为临床诊断提供快速筛查依据，并可用于流行病学调查及化疗效果评估[1][9]。

二、核心检测方法

基于碱性复红染色原理：在石炭酸作用下加热促进染色剂渗透，抗酸菌细胞壁分枝菌酸与复红结合形成稳定复合物，经酸性酒精脱色后仍保留红色，最后用亚甲蓝复染背景[1][2][10]。荧光法则使用金胺O染色，通过荧光显微镜观察[2][9]。

三、检出限与定量限

直接涂片法敏感度为5000-10000菌条/毫升样本，低于培养法（约100菌条/ml）及分子检测法（约10菌条/ml）[10]。阳性分级标准中，1-9条/50视野（荧光法）与1-8条/300视野（萋-尼氏法）存在统计学差异[9]。

四、质控样品要求

需包含阳性质控片（含结核杆菌）和阴性质控片（非抗酸菌）。样本需新鲜采集，痰液需选取脓样或血样部分，组织样本需研磨处理后制片[10]。

五、关键实验步骤

1. 涂片制备：均匀涂抹样本于载玻片，厚度适中
2. 初染：石炭酸复红加热染色5分钟
3. 脱色：3%盐酸酒精脱色至无红色溢出
4. 复染：亚甲蓝复染30秒后冲洗
5. 镜检：油镜下观察红色杆状抗酸菌[1][2][10]

六、特别说明

1. 需严格控制脱色时间以避免假阴性
2. 荧光法需专用显微镜且成本较高，但灵敏度相当[9]
3. 阳性结果仅提示抗酸菌存在，需结合临床判断[10]
4. 操作人员需具备生物安全防护资质[10]

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