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DTA培养基(葡萄糖胰蛋白胨琼脂)/用于嗜热菌芽孢(需氧芽孢总数,平酸芽孢和厌氧芽孢)分离培养(SN标准)_
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DTA培养基(葡萄糖胰蛋白胨琼脂)/用于嗜热菌芽孢(需氧芽孢总数,平酸芽孢和厌氧芽孢)分离培养(SN标准)

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DTA培养基(葡萄糖胰蛋白胨琼脂)介绍:

用途:用于嗜热菌芽孢( 需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢 )的分离培养。

成分(g/L)

胰酪蛋白胨10.0
葡萄糖5.0
琼脂15.0
溴甲酚紫0.04
pH值6.7±0.125℃

检验原理:胰酪蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵的糖,溴甲酚紫是酸碱指示剂;琼脂为凝固剂。

用法:

称取本品 30.0g,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。

嗜热脂肪芽孢杆菌在葡萄糖胰蛋白胨琼脂上的生长特征:

黄色菌落

DTA培养基微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置55℃需氧培养48小时。 注:回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。

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以上信息仅供参考,请以实物批次为准!

1. 适用范围

NY/T 1331-2007标准适用于乳制品中嗜热需氧芽孢菌的计数检测,包括原料乳、液态乳制品及乳粉等。DTA培养基为本标准推荐的专用培养基,通过显色反应(溴甲酚紫指示剂)判定芽孢形成情况[4]。

2. 核心检测方法

采用倾注平板法进行菌落计数。样品经80℃热处理10分钟后稀释接种,于55±1℃培养48-72小时。典型菌落呈黄色(产酸)且中心有深色斑点(芽孢形成),需结合显微镜确认芽孢结构[4][6]。

3. 检出限与定量限

本标准规定定量检测范围为10-300 CFU/平板。当样品稀释度达到10⁻³时仍无典型菌落,则报告为<10 CFU/g;若最高稀释度平板菌落数>300,需重新选择更高稀释度检测[4]。

4. 质控样品要求

每批次实验需同步进行空白对照(无菌水)和阳性对照(嗜热脂肪地芽孢杆菌ATCC 12980)。培养基质控要求:灭菌后pH为6.9±0.2,无菌检查合格,且阳性对照需在24小时内出现明显芽孢特征[4][6]。

5. 关键实验步骤

1. 培养基制备:30g干粉溶于1L蒸馏水,121℃灭菌20分钟,冷却至50℃倾注平板
2. 样品处理:30g样品+270mL缓冲液,80℃水浴震荡10分钟
3. 梯度稀释:采用10倍系列稀释法至10⁻⁶
4. 培养观察:55℃培养72小时,记录黄色带深色核心的菌落

6. 特别说明

1. 培养基开封后需密封避光保存,建议3个月内用完
2. 检测含防腐剂样品时需增加中和剂
3. 芽孢染色须使用孔雀绿-沙黄染色法确认
4. 高温处理步骤不可省略,确保杀灭营养细胞

以上信息仅供参考,请以相应标准的原文为准!

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