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四环素检定琼脂/用于四环素残留的微生物学检定(SN标准)_
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四环素检定琼脂/用于四环素残留的微生物学检定(SN标准)

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四环素检定琼脂介绍:

用途:用于四环素残留的微生物学检定(SN标准)。

成分(g/L)

胰酪蛋白胨6.0
牛肉浸粉1.5
酵母浸粉3.0
琼脂14.0
pH值5.7-5.925℃

检验原理:

本法是利用抗生素在琼脂培养基内的扩散作用,抑菌圈直径与抗生素的浓度或活性有关;比较标准品与供试品两者对接种的试验菌产生抑菌圈的大小,以测定供试品效价的一种微生物学方法。

用法:

称取本品24.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。

四环素检定琼脂微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。

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国家标准 GB 31656.11-2021 解读

适用范围适用于水产品中土霉素、四环素、金霉素、多西环素残留量的测定[3]
核心检测方法高效液相色谱法(HPLC)结合紫外检测器定量分析
检出限与定量限土霉素/四环素检出限10 μg/kg,定量限20 μg/kg;金霉素/多西环素检出限20 μg/kg,定量限40 μg/kg
质控样品要求需同时进行空白对照、添加回收实验,回收率应控制在80%-120%之间
关键实验步骤1. 样品用EDTA-Mcllvaine缓冲液提取
2. 经HLB固相萃取柱净化
3. 流动相为乙腈-0.01 mol/L草酸溶液梯度洗脱
特别说明需注意四环素类化合物光敏感性,全程避光操作

行业标准 NP 2264-1987 解读

适用范围动物饲料中氯四环素、土霉素和四环素含量的微生物学检测[3]
核心检测方法琼脂扩散生物测定法,使用藤黄微球菌(Micrococcus luteus)作为指示菌
检出限与定量限检测限为0.05 mg/kg,定量范围0.1-5.0 mg/kg
质控样品要求需设置标准品浓度梯度(0.1/0.5/1.0 mg/kg)建立标准曲线
关键实验步骤1. 样品经pH 4.5磷酸盐缓冲液提取
2. 45℃琼脂培养基制备
3. 37℃培养18-24小时测量抑菌圈直径
特别说明培养基需含0.5%葡萄糖和1%蛋白胨,保持琼脂厚度4.0±0.1 mm

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