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亚硫酸铁琼脂/用于厌氧亚硫酸盐还原细菌计数

HB9104-3

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250g

hopebio

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亚硫酸铁琼脂介绍：

用途:用于厌氧亚硫酸盐还原细菌计数。成分(g/L)

Enzymatic Digest of Casein/胰酪蛋白胨	15.0
Pancreatic Digest of Soya/大豆蛋白胨	5.0
Yeast Extract/酵母浸粉	5.0
Disodium Disulfite(Na₂S₂0₅)/偏重亚硫酸钠	0.5
lron(III) Ammoniun Citrate/柠檬酸铁铵	1.0
Agar/琼脂	13.5
pH值7.6±0.2	25℃

用法称取本品40.0g,加热搅拌煮沸,完全溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管或三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。亚硫酸铁琼脂微生物灵敏度试验: 按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃厌氧培养24-48小时。

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GB 4789.XX 亚硫酸铁琼脂检测标准解读

适用范围

本标准适用于食品、环境样品中厌氧亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌（如产气荚膜梭菌）的分离与计数[3][5]。

核心检测方法

采用倾注平板法，通过培养基中的偏重亚硫酸钠和柠檬酸铁铵指示系统，特异性检测硫化氢生成菌。黑色菌落形成即为阳性反应[3][7]。

检出限与定量限

最低检出限为1 CFU/g，定量检测范围10-300 CFU/g。需通过梯度稀释法保证菌落计数在有效统计区间[5][7]。

质控样品要求

需同步接种产气荚膜梭菌标准菌株（ATCC 13124）作阳性对照，大肠埃希氏菌（ATCC 25922）作阴性对照。阳性对照应产生典型黑色菌落，阴性菌不生长[7]。

关键实验步骤

1. 样品预处理：无菌操作称取25g样品加入225mL稀释液均质
2. 梯度稀释：制备10^-1-10^-6系列稀释度
3. 培养基制备：每升蒸馏水添加47g干粉，121℃灭菌15分钟[1][7]
4. 培养条件：倾注平板后置于36±1℃厌氧环境培养24-48小时

特别说明

1. 培养基灭菌后可能出现微量黑色沉淀属正常现象
2. 需在灭菌后7日内使用以保证氧化还原电位稳定性
3. 检测梭菌时需配合动力试验排除假阳性[5][7]

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