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亚硫酸铁琼脂/用于厌氧亚硫酸盐还原梭菌的计数

HB0304

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250g

hopebio

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亚硫酸铁琼脂介绍：

产品用途：用于厌氧亚硫酸盐还原梭菌的计数

成分（g/L）

胰蛋白胨	15.0
大豆蛋白胨	5.0
酵母浸膏	5.0
偏重亚硫酸钠	1.0
柠檬酸铁铵	1.0
琼脂	20.0
pH值7.5-7.7	25℃

检验原理：酵母浸膏、大豆蛋白胨、胰蛋白胨提供氮源、维生素、生长因子；柠檬酸铁铵和偏重亚硫酸钠用于检测硫化氢的产生，使菌落中心呈黑色；琼脂为凝固剂。

产品用法：称取本品4.7克，溶解于100ml蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15分钟备用。一周内用完。

注：培养基中有少量柠檬酸铁铵，灭菌后可能有微量黑色沉淀，摇匀倒平板即可正常使用。

产气荚膜梭菌在亚硫酸铁琼脂上的生长特征：

黑色菌落

亚硫酸铁琼脂 微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃厌氧培养24-48小时。注：回收率计算时，用TSC琼脂做对照培养基。

亚硫酸铁琼脂培养基的使用原理及方法：

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国家标准解读：GB 4789.13-2023 食品安全国家标准食品微生物学检验梭菌检验

标准名称及标准号

GB 4789.13-2023《食品安全国家标准食品微生物学检验梭菌检验》

适用范围	适用于食品及食品加工环境中厌氧亚硫酸盐还原梭菌（如产气荚膜梭菌）的定量检测，包括乳制品、肉制品、水产品等。

核心检测方法

采用倾注平板法：样品经梯度稀释后，接种于亚硫酸铁琼脂培养基，厌氧条件下培养（36±1℃，48小时），通过黑色菌落计数判定目标菌浓度。

检出限与定量限

检出限为1 CFU/g（固体）或1 CFU/mL（液体）；定量限为10 CFU/g或10 CFU/mL，需根据稀释度及菌落数计算。

质控样品要求

1. 阳性对照：产气荚膜梭菌标准菌株（ATCC 13124）
2. 阴性对照：无菌生理盐水或空白培养基
3. 培养基质控：每批次需验证亚硫酸铁琼脂的选择性和灵敏度

关键实验步骤

1. 样品处理：25 g/mL样品与稀释液均质
2. 梯度稀释：10^-1至10^-6系列稀释
3. 接种培养：取1 mL稀释液倾注琼脂，厌氧罐（含气体发生袋）培养
4. 结果判读：计数典型黑色菌落（直径1-3 mm，边缘整齐）

特别说明	1. 厌氧条件需严格控制在氧气浓度＜1% 2. 亚硫酸铁琼脂需避光保存，临用前水浴融化并冷却至50℃ 3. 非目标菌（如某些芽孢杆菌）可能产生类似菌落，需通过镜检或生化试验验证

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