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游离生物素测定培养基（停产）/用于婴儿食品和乳粉中游离生物素测定

HB7022

Free Biotin Assay Medium

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250g

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游离生物素测定培养基（停产）介绍：

用途：用于婴儿食品和乳粉中游离生物素测定。

成分(g/L)

酸水解酪蛋白	12.0
葡萄糖	40.0
乙酸钠	20.0
磷酸二氢钾	1.0
磷酸氢二钾	1.0
DL-色氨酸	0.2
L-胱氨酸盐酸盐	0.2
腺嘌呤硫酸盐	0.02
鸟嘌呤盐酸盐	0.02
尿嘧啶	0.02
硫酸镁	0.4
氯化钠	0.02
硫酸亚铁	0.02
硫酸锰	0.02
核黄素	0.002
对氨基苯甲酸	0.0002
盐酸吡哆醇	0.004
盐酸硫胺素	0.002
烟酸	0.002
泛酸钙	0.002
pH6.8±0.2	25℃

用法：

称取本品7.5g，加热溶解于100ml高纯双蒸馏水中，分装试管中，每管5ml，加入标准或测试样品，用高纯双蒸馏水调整体积至10ml，121℃高压灭菌5分钟，备用。

注：试验中所用的玻璃器皿必须清洗干净，不能有任何的化学试剂残留和去污剂残留，并经250℃高温消毒至少1小时。

注：培养基中含多种维生素类成分，灭菌后有沉淀，分装时需搅拌均匀。

游离生物素测定培养基微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养19-20小时。

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产品货号	产品名称	产品规格	产品说明及用途
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国家标准 GB 5009.259-2016 解读

适用范围	适用于食品中生物素的定量检测，涵盖谷薯类、肉类、新鲜果蔬、藻类、蛋类、豆类、坚果类、内脏及强化生物素食品等[3][7]。

核心检测方法

采用微生物法，利用植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）对生物素的依赖性。通过测量菌株生长后的透光率与标准曲线比对，计算试样中生物素含量[3][7]。

检出限与定量限

标准未明确具体数值，但要求标准曲线需满足线性关系（R²≥0.99），并通过质控样品验证检测灵敏度[3][7]。

质控样品要求

需使用植物乳杆菌标准菌株（如ATCC 8034），培养基需符合GB 4789.28-2013质量要求。质控样品需验证生长曲线稳定性及空白对照无菌性[7]。

关键实验步骤

1. 样品前处理：根据食品类别进行酶解、酸解或碱解；
2. 培养基配制：严格按比例溶解生物素测定培养基并灭菌；
3. 接种培养：菌悬液浓度需校准至透光率80%-82%；
4. 透光率测定：培养16-24小时后测量530nm波长透光率[3][7]。

特别说明	1. 玻璃器皿需经250℃干热灭菌1小时； 2. 实验需在一级生物安全实验室进行； 3. 生物废弃物需121℃高压灭菌20分钟处理[7]。

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