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维生素B12测定用培养基（停产）/用于婴儿食品和乳粉中维生素B12测定

HB7041-1

Vitamin B12 Assay Broth

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250g

hopebio

见证书

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维生素B12测定用培养基（停产）介绍：

用途：用于婴儿食品和乳粉中维生素B12测定。

保存条件：2-8℃

成分(mg/L)

酸水解酪蛋白	15000
葡萄糖	40000
乙酸钠	20000
L-胱氨酸	400
DL-色氨酸	400
腺嘌呤	20
鸟嘌呤	20
尿嘧啶	20
黄嘌呤	20
盐酸硫胺素	1
核黄素	1
烟酸	2
泛酸钙	1
盐酸吡哆醇	4
p-氨基苯甲酸	2
生物素	0.01
叶酸	0.2
吐温80	2000
磷酸氢二钾	1000
磷酸二氢钾	1000
硫酸镁	400
氯化钠	20
硫酸亚铁	20
硫酸锰	20
天冬门酰胺	200
抗坏血酸	4000
盐酸吡哆醛	4
盐酸吡哆胺	0.8
pH6.0±0.1	25℃

检验原理：

利用莱士曼氏乳酸杆菌对维生素B12的特异性和灵敏性，定量测定出试样中维生素B12的含量。

用法：

称取本品8.5g，加热搅拌溶解于100ml蒸馏水中，煮沸2-3分钟，分装试管，每管5ml，使沉淀物分散均匀，加入标准品或测试样品，用蒸馏水补体积至10ml，121℃高压灭菌5分钟，备用。

注：培养基中含多种维生素类成分，灭菌后有沉淀，分装时需搅拌均匀。

维生素B12测定用培养基微生物质控结果：

维生素B12测定用培养基微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养19-20小时。

维生素B12测定用培养基（停产）相关产品：

产品货号	产品名称	产品规格	产品说明及用途
HB7019-2	烟酸测定用培养基(GB5009.89-2023标准)Nicotinic Acid Assay Medium	250g	用于微生物分析方法检测奶粉或食品中烟酸的含量
HB7017-1	泛酸测定培养液(GB5009.210-2023标准)Pantothenic Acid Assay Medium	250g	用于微生物分析方法检测奶粉或食品中泛酸的含量
HB8684-2	吡哆醇Y培养基(GB5009.154-2023标准)Pyridoxine Y Medium	250g	用于通微生物学方法测定食品中维生素B6的含量
HB8893-1	吡哆醇Y琼脂培养基(GB5009.154-2023标准)Pyridoxine Y Agar Medium	250g	用于卡尔斯伯酵母菌的培养和菌种保存
HB7016-1	肌醇测定培养基(GB5009.270-2023标准)Inositol Assay Medium	250g	用于婴幼儿食品和乳品中肌醇的测定
HB8896-1	乳酸杆菌琼脂(GB5009.210-2023标准)Lactobacillus Agar	250g	用于泛酸测定中植物乳杆菌的活化
HB7041-2	维生素B12测定用培养基(GB5009.285-2022)Vitamin B12 Assay Broth	250g	用于婴儿食品和乳粉中维生素B12测定
HB7016	肌醇测定培养基（停产）Inositol Assay Medium	250g	用于婴幼儿食品和乳品中肌醇的测定
HB7019	烟酸测定用培养基（停产）Nicotinic Acid Assay Medium	250g	用于微生物分析方法检测奶粉或食品中烟酸的含量
HB7020	叶酸测定培养基（停产）Folic Acid Assay Medium	250g	用于婴儿食品和乳粉中叶酸测定
HB7017	泛酸测定培养基（停产）Pantothenic Acid Assay Medium	250g	用于婴儿食品和乳粉中泛酸测定
HB7022	游离生物素测定培养基（停产）Free Biotin Assay Medium	250g	用于婴儿食品和乳粉中游离生物素测定
HB8684	吡哆醇Y培养基（停产）Pyridoxine Y Medium	250g	用于通过微生物学方法检测吡多醇含量
HB7020-1	叶酸测定用培养液（GB5009.211-2022）Folic Acid Assay Medium	250g	用于婴儿食品和乳粉中叶酸测定
HB7019-1	烟酸测定用培养基（停产）Nicotinic Acid Assay Medium	250g	用于微生物分析方法检测奶粉或食品中烟酸的含量
HB8684-1	吡哆醇Y培养基（停产）Pyridoxine Y Medium	250g	用于通过微生物学方法检测吡多醇含量（GB 5009.154-2016）
HB7022-1	生物素测定培养基（GB 5009.259-2023）Biotin Assay Medium	250g	用于婴儿食品和乳粉中游离生物素测定

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国家标准GB 5009.285-2022解读

适用范围

本标准适用于婴幼儿食品、乳及乳制品、肉及肉制品中维生素B12的测定。第三法（微生物法）适用于婴幼儿食品和乳品，采用莱士曼乳酸杆菌（ATCC 7830）作为检测菌株[2][6]。

核心检测方法

微生物法基于莱士曼乳酸杆菌对维生素B12的特异性需求，通过菌株生长反应（浊度或酸度分析）定量测定。样品需经酶解处理，并通过免疫亲和柱净化浓缩后检测[2][6]。

检出限与定量限

微生物法的检出限为0.03 μg/100g，定量限为0.1 μg/100g。标准曲线需使用维生素B12标准品制备，浓度范围为30-200 ng/mL[6][8]。

质控样品要求

需使用标准菌株（ATCC 7830）定期验证菌种活性。培养基需不含维生素B12，但包含其他必需养分，如无维生素酸水解酪蛋白、葡萄糖、天门冬酰胺等[3][8]。

关键实验步骤

1. 样品前处理：酶解后，用氧化氰溶液转化钴胺素异构体为氧钴胺素。
2. 菌种活化：将菌株接种至乳酸杆菌肉汤培养基，37℃培养24小时。
3. 接种与培养：菌悬液接种至待测样品及标准品培养基，培养后测定生长反应[3][6][8]。

特别说明

- 实验器具需严格清洁，避免外源污染影响结果。
- 菌种需专用培养基保存，避免交叉污染。
- 方法不适用于含抗生素或抑菌成分的样品[3][6][8]。

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