生物素测定培养基（GB 5009.259-2023）/用于婴儿食品和乳粉中游离生物素测定
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用途：用于婴儿食品和乳粉中游离生物素测定。
成分(g/L)
用法：
称取本品 7.5克，加热溶解于100ml高纯双蒸馏水中，分装试管中，每管5ml，加入标准或测试样品，用高纯双蒸馏水调整体积至10ml，121℃高压灭菌5分钟，备用。
注意：试验中所用的玻璃器皿必须清洗干净，不能有任何的化学试剂残留和去污剂残留，并经250℃高温消毒至少1小时。
注：培养基中含多种维生素类成分，灭菌后有沉淀，分装时需搅拌均匀。
游离生物素测定培养基微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养19-20小时。
以上信息仅供参考，请以实物批次为准！
GB 5009.259-2023 标准解读
1. 适用范围
第一法（液相色谱-串联质谱法）适用于调制乳粉、特殊膳食用食品中生物素的测定；第二法（微生物法）适用于一般食品中生物素的测定[2][3]。
2. 核心检测方法
第一法：试样经溶解提取，含淀粉试样需淀粉酶酶解后，通过C18反相色谱柱分离，采用液相色谱-串联质谱多离子反应监测，同位素稀释内标法定量[2][3]。
第二法：利用植物乳植杆菌生长与生物素含量的相关性，通过标准曲线计算试样含量[3][6]。
3. 检出限与定量限
标准中未明确给出具体数值，需根据实验室验证数据确定[3][10]。
4. 质控样品要求
需使用标准曲线法验证线性范围，第一法要求添加同位素内标（如生物素-D4），第二法需定期校准菌株活性[3][10]。
5. 关键实验步骤
第一法：样品前处理需进行蛋白沉淀、离心过滤；色谱条件为0.1%甲酸-10mmol/L甲酸铵水溶液与乙腈梯度洗脱[2][10]。
第二法：需制备生物素标准溶液，控制培养基pH值为6.8±0.1，培养温度37℃±0.5℃[3][6]。
6. 特别说明
第一法适用于高灵敏度检测场景，第二法适用于常规检测但需注意菌种活性维护；含淀粉样品必须进行酶解预处理[2][3][6]。
以上信息仅供参考，请以相应标准的原文为准！