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XLD培养基平板(9cm)/选择性培养基,主要用于分离志贺氏菌属,亦可用于分离沙门氏菌(GB4789.4)_
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XLD培养基平板(9cm)/选择性培养基,主要用于分离志贺氏菌属,亦可用于分离沙门氏菌(GB4789.4)

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XLD培养基平板(9cm)介绍:

用途:选择性培养基,主要用于分离志贺氏菌属,亦可用于分离沙门氏菌

包装方式:一次性无菌塑料平皿 9cm 

保存温度:2-8℃ 避光保存

成分(g/L)

酵母浸粉3.0
L-赖氨酸5.0
乳糖7.5
蔗糖7.5
木糖3.75
氯化钠5.0
硫代硫酸钠6.8
柠檬酸铁铵0.8
脱氧胆酸钠2.5
苯酚红0.08
琼脂15.0
pH7.4±0.225

检验原理:

酵母浸粉为细菌生长提供维生素和辅助因子,木糖、乳糖和蔗糖作为可发酵碳源。除志贺氏菌外,其他大多数肠杆菌均发酵木糖,加入赖氨酸是为了鉴别沙门氏菌。沙门氏菌发酵木糖产酸,形成的酸性环境有利于该菌产生脱羧酶,沙门氏菌使赖氨酸脱羧,从而使培养基的pH 升高向碱性转变,但这种转变可因其他菌发酵乳糖和蔗糖产生大量的酸而被阻止。在碱性的条件下,硫代硫酸钠及柠檬酸铁铵与沙门氏菌产生的硫化氢反应,使得菌落的颜色呈黑色;但当酸性条件下时,这种反应被抑制。苯酚红作为酸碱指示剂,氯化钠维持体系渗透压平衡,去氧胆酸盐抑制革兰氏阳性菌的生长。

XLD培养基上细菌的菌落特征:

肠炎沙门氏菌CMCC50760

无色菌落,有黑心

大肠埃希氏菌ATCC25922

黄色菌落

福氏志贺氏菌CMCC51572

无色菌落,无黑心

甲型副伤寒沙门菌CMCC50093

无色菌落,无黑心

奇异变形杆菌CMCC49005

黄色菌落,有黑心

鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028

无色菌落,有黑心

XLD培养基平皿9cm微生物灵敏度试验:

接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。

GB4789.4 沙门氏菌检验程序:

木糖赖氨酸脱氧胆酸钠(XLD)琼脂原理及实验现象:

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GB/T 4789.4-2008 食品卫生微生物学检验 沙门氏菌检验

适用范围 适用于食品、饲料及相关样品中沙门氏菌的定性检测,包括预增菌、选择性增菌、分离培养及生化鉴定等步骤[1]。
核心检测方法 使用XLD琼脂平板作为选择性分离培养基,通过典型菌落形态(粉红色菌落带黑色中心)和生化反应(如三糖铁试验)进行鉴定[1]。
检出限与定量限 未明确规定定量限,检出限依赖增菌步骤的灵敏度,通常可检测1-10 CFU/g样品[1]。
质控样品要求 需使用标准沙门氏菌株(如ATCC 14028)进行培养基性能验证,要求阳性对照菌落典型率≥90%[1]。
关键实验步骤 样品前处理→缓冲蛋白胨水预增菌→RV沙门氏菌增菌液选择性增菌→XLD平板划线分离→生化确认试验[1]。
特别说明 XLD培养基需新鲜制备(保存不超过24小时),去氧胆酸钠成分对革兰氏阳性菌有抑制作用[1]。

ISO 6579:2002 食品和动物饲料微生物学 沙门氏菌检测水平方法

适用范围 国际通用的沙门氏菌检测方法,适用于食品链中所有环节的样品检测[1]。
核心检测方法 推荐使用XLD培养基作为分离培养基,结合Rambach琼脂进行复合分离,提高检出特异性[1]。
质控要求 要求每批次培养基进行生长率测试,目标菌落直径需达到0.5-1.5mm[1]。

ISO 21567:2004 食品微生物学 志贺氏菌检测水平方法

适用范围 专门针对志贺氏菌的检测标准,XLD培养基作为选择性分离介质使用[1]。
特别说明 强调XLD培养基中木糖与赖氨酸的代谢差异,用于区分志贺氏菌与其他肠杆菌科细菌[1]。

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