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HE琼脂平板（9cm）/用于沙门氏菌的选择性分离培养（GB 4789.4-2024）_
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HE琼脂平板（9cm）/用于沙门氏菌的选择性分离培养（GB 4789.4-2024）

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HE琼脂平板（9cm）介绍：

用途：用于沙门氏菌的选择性分离培养

包装方式：一次性无菌塑料平皿 9cm 

保存温度：2-8℃ 避光保存

成分(g/L)

蛋白胨12.0
牛肉浸粉3.0
胆盐20.0
乳糖12.0
蔗糖12.0
水杨苷2.0
氯化钠5.0
溴麝香草酚兰0.064
硫代硫酸钠6.8
柠檬酸铁铵0.8
脱氧胆酸钠2.0
酸性品红0.1
琼脂18.0
pH值7.5±0.225℃
检验原理：

蛋白胨、酵母粉在培养基中作为基础营养物质提供菌体细胞生长所需的氮源、碳源等；氯化钠维持体系渗透压平衡；胆盐和去氧胆酸钠主要抑制革兰氏阳性菌的生长；培养基中的蔗糖、水杨苷、乳糖作为鉴别系统；溴麝香草酚兰和酸性品红作为酸碱指示剂，能把发酵糖类和不发酵糖类的细菌区别开来，前者为橘黄色菌落，后者为淡蓝绿色菌落；柠檬酸铁铵及硫代硫酸钠分别做为产硫化氢的指示剂和底物，能产硫化氢但不发酵糖类的沙门氏菌的菌落边缘呈无色半透明，中心呈黑色。

不同细菌在HB琼脂平板上的生长特征：

大肠埃希氏菌ATCC25922

无色菌落，无黑色中心

福氏志贺氏菌ATCC12022

蓝绿色菌落，无黑色中心

甲型副伤寒沙门菌CMCC50093

蓝绿色菌落，无黑色中心

普通变形杆菌ATCC13315

蓝绿色菌落，黑色中心

奇异变形杆菌CMCC49005

蓝绿色菌落，黑色中心

鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028

蓝绿色菌落，黑色中心

HE琼脂平皿9cm微生物灵敏度试验：

接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养18-24小时。

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    GB 4789.4-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验

    适用于食品及其加工环境中沙门氏菌的分离与鉴定，特别规定HE琼脂作为选择性分离培养基的使用规范[4]。
    采用选择性增菌培养后，划线接种HE琼脂平板，通过菌落形态（蓝绿色至蓝色、中心黑色）及生化试验进行确认[4]。
    检出限为1CFU/25g（L），定量限需通过方法验证确定，满足食品样品中低浓度沙门氏菌的检测需求[4]。
    每批次实验需同步使用沙门氏菌标准菌株（如ATCC 14028）作为阳性对照，并设置非目标菌（如大肠埃希氏菌）作为阴性对照[4]。
    1. 样品预增菌（缓冲蛋白胨水，37℃ 18h）；2. 选择性增菌（TTB和SC培养基）；3. HE琼脂划线培养（35℃ 24h）；4. 可疑菌落生化鉴定[4]。
    HE琼脂需避光保存（2-8℃），开封后需在1周内用完；培养基pH值应严格控制在7.5±0.2[4]。

    GB 4789.28-2013 食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求

    规范食品微生物检验中培养基的理化特性、微生物生长性能及稳定性要求，适用于HE琼脂等选择性培养基的质量控制[4]。
    包含物理化学测试（凝胶强度、pH值）、微生物学测试（目标菌生长率≥80%、选择性抑制率≥60%）及稳定性验证[4]。
    目标菌在HE琼脂上的生长率需≥50%，非目标菌抑制率≥80%，定量限通过对比试验确定[4]。
    每批次培养基需使用标准菌株（如鼠伤寒沙门氏菌ATCC 14028）验证生长性能，同时测试选择性抑制能力[4]。
    1. 培养基配制后需进行灭菌效果验证；2. 冷却至50℃倾注平板；3. 成品需进行无菌试验和性能测试[4]。
    HE琼脂配制过程中禁止反复加热溶解，灭菌后需在2小时内完成倾注，避免光照和高温储存[4]。

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