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肠球菌琼脂（胆汁七叶苷叠氮钠琼脂）/用于食品和水中肠球菌的计数

HB0133-3

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250g

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见证书

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肠球菌琼脂（胆汁七叶苷叠氮钠琼脂）介绍：

用途:用于食品和水中肠球菌的计数。

叠氮化钠的作用

叠氮化钠主要抑制革兰氏阴性细菌的生长发育，对变形杆菌抑制效果非常显著。

成分(g/L):

胰蛋白胨	17.0
牛肉浸粉	3.0
酵母浸粉	5.0
牛胆粉	10.0
氯化钠	5.0
柠檬酸钠	1.0
七叶苷	1.0
柠檬酸铁铵	0.5
叠氮化钠	0.25
琼脂	13.5
pH值7.1 ± 0.2	25℃

用法

称取本品56.3g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15min,冷至46±1℃,倾入含1ml 样品液平皿中,约15ml 培养基,混匀,凝固。35± 2℃倒置培养基培养24±2h。注：从保温开始至做成平板的时间不要超过4h。

注:培养基中有少量柠檬酸铁铵，灭菌后可能有微量黑色沉淀，摇匀倒平板即可正常使用。

肠球菌琼脂微生物质控结果：


粪肠球菌褐色菌落，菌落周围变黑				屎肠球菌褐色菌落，菌落周围变黑


金黄色葡萄球菌部分抑制				大肠埃希氏菌抑制

肠球菌琼脂原理及现象：

肠球菌琼脂(胆汁-七叶苷叠氮钠琼脂）微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置35±2℃需氧培养24±2小时。注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。

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GB 4789.40-2016 食品安全国家标准肠球菌检验

适用范围：适用于食品中肠球菌的定性检测，包括粪肠球菌和屎肠球菌等典型致病菌株的筛选。

核心检测方法：采用胆汁七叶苷叠氮钠琼脂作为选择性培养基，通过典型菌落形态（黑色晕圈）和生化试验（七叶苷水解）进行鉴定。

检出限与定量限：最低检出限为1 CFU/g，定量检测需结合平板计数法，有效计数范围为10-300 CFU/平板。

质控样品要求：每批次实验需同步接种粪肠球菌（ATCC 29212）作为阳性对照，大肠埃希氏菌（ATCC 25922）作为阴性对照。

关键实验步骤：① 样品均质后梯度稀释；② 36℃±1℃培养24-48小时；③ 挑取典型菌落进行胆汁耐受试验和PYR水解试验验证。

特别说明：叠氮钠抑制革兰氏阴性菌效果显著，但对部分链球菌属可能产生交叉反应，需结合分子鉴定确认。

SN/T 1933.1-2007 动物产品中肠球菌检测

适用范围：进出口动物源性食品和饲料中肠球菌的分离与计数，重点关注公共卫生风险控制。

核心检测方法：规定使用胆汁七叶苷叠氮钠琼脂进行初筛，结合API 20 Strep或VITEK系统完成生化鉴定。

检出限与定量限：定量检测要求样品稀释度选择需保证至少1个平板出现30-300个典型菌落。

质控样品要求：要求每20个样品设置1组阴阳性对照，并定期使用标准菌株验证培养基选择性。

关键实验步骤：强调样品前处理需采用缓冲蛋白胨水预增菌，培养时间延长至48小时以提高检出率。

特别说明：明确培养基pH值需控制在7.2±0.2，高压灭菌后需冷却至50℃以下方可添加叠氮钠。

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粪肠球菌褐色菌落，菌落周围变黑				屎肠球菌褐色菌落，菌落周围变黑


金黄色葡萄球菌部分抑制				大肠埃希氏菌抑制