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肠球菌琼脂/用于肠球菌的快速选择性的分离培养和计数

HB0133

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250g

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肠球菌琼脂介绍：

用途：用于肠球菌的快速选择性的分离培养和计数。

成分（g/L）

牛肉浸粉	3.0
胰酪蛋白胨	17.0
酵母粉	5.0
牛胆粉	10.0
氯化钠	5.0
七叶苷	1.0
柠檬酸铁胺	0.5
叠氮化钠	0.25
柠檬酸钠	1.0
琼脂	13.5
PH值7.1±0.2	25℃

检验原理：

胰蛋白胨和牛肉浸粉、酵母粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；细菌水解七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素；柠檬酸钠、牛胆粉和叠氮化钠为选择性抑菌剂，抑制非链球菌的细菌；琼脂为凝固剂。

用法：

称取本品56.25g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，备用。

注:培养基中有少量柠檬酸铁铵，灭菌后可能有微量黑色沉淀，摇匀倒平板即可正常使用。

肠球菌琼脂微生物质控结果：


粪肠球菌褐色菌落，菌落周围变黑				屎肠球菌褐色菌落，菌落周围变黑


金黄色葡萄球菌部分抑制				大肠埃希氏菌抑制

肠球菌琼脂微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置35±2℃需氧培养24±2小时。注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。

肠球菌琼脂同名产品推荐：

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HB0133-1	叠氮钠-结晶紫-七叶苷琼脂Bile Esculin Azide Agar	250g	用于肠球菌的快速选择性分离培养和计数

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DBS22/018-2012 标准解读

适用范围	本标准适用于各类食品及食源性肠球菌病的检验，包含常规培养法（第1法）和固定酶底物法（第2法）两种检测方法[1]

核心检测方法

第1法采用常规培养技术，需配合Vitek GNI全自动微生物分析仪或API 20strep试剂条；第2法使用固定酶底物技术，适用于快速检测[1]

检出限与定量限

标准未明确具体数值，需根据实验条件通过质控样品验证。常规培养法灵敏度取决于培养基选择性，固定酶底物法检测下限优于传统方法[1]

质控样品要求

需使用标准菌株（如ATCC 29212）进行阳性对照，每批次实验应包含空白对照。样品均质需在无菌条件下完成，均质时间控制在2-3分钟[1][6]

关键实验步骤

1. 样品预处理：无菌均质后1:10稀释
2. 选择性增菌：45℃培养24小时
3. 分离培养：使用胆汁七叶苷叠氮钠琼脂平板
4. 确证试验：包括革兰染色、过氧化氢酶试验和API生化鉴定[1][6]

特别说明	1. 引用GB/T 4789.28培养基制备规范 2. 固定酶底物法需注意反应时间控制 3. 实验废弃物需按生物安全二级标准处理 4. 与SN/T 1933.1方法存在培养温度差异[1][6]

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粪肠球菌褐色菌落，菌落周围变黑				屎肠球菌褐色菌落，菌落周围变黑


金黄色葡萄球菌部分抑制				大肠埃希氏菌抑制