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滤膜肠球菌琼脂/用于水或其他样品中肠球菌的滤膜法分离或计数

HB0156

Filter Membrane Enterococcus Agar

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250g

hopebio

见证书

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粪肠球菌
ATCC29212 | 10^7cfu/ml

滤膜肠球菌琼脂介绍：

用途：用于水或其他样品中肠球菌的滤膜法分离或计数。

成分(g/L)

䏡蛋白胨	20.0
酵母浸粉	5.0
葡萄糖	2.0
磷酸氢二钾	4.0
叠氮化钠	0.4
TTC	0.1
琼脂	10.0
pH值7.2±0.2	25℃

检验原理：

䏡蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉提供碳源和氮源满足细菌生长的需求；叠氮化钠可抑制肠球菌之外的细菌生长；TTC为显色剂，肠球菌可与TTC反应使菌落呈红色。

用法：

称取本品42.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，冷至45-50℃时，倾入无菌平皿，备用。无需高压灭菌。

粪肠球菌在滤膜肠球菌琼脂上的生长特征：

红色菌落

滤膜肠球菌琼脂微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养24-48小时。注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。

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HB0268a	1%TTC溶液	1ml/支*5	每支添加于100mlKF链球菌琼脂中
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HB0133-1	叠氮钠-结晶紫-七叶苷琼脂Bile Esculin Azide Agar	250g	用于肠球菌的快速选择性分离培养和计数

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1. 《食品和水中肠球菌检验方法第2部分：滤膜法》

适用范围	适用于食品和水中肠球菌的滤膜法检测，特别针对水样中低浓度肠球菌的定量分析[3]。
核心检测方法	通过滤膜富集样品中的微生物，转移至选择性培养基（如KF琼脂）进行培养，肠球菌形成特征性红色菌落[3][8]。
检出限与定量限	检出限为1 CFU/100 mL，定量限为10-100 CFU/100 mL，具体取决于样品类型和过滤体积[3]。
质控样品要求	需使用标准菌株（如粪肠球菌CICC 25019）进行阳性对照，同时设置阴性对照（如大肠埃希氏菌CICC 25012）[4][8]。
关键实验步骤	包括样品过滤（孔径0.45 μm滤膜）、滤膜转移至培养基、36℃培养48小时、红色菌落计数及确证试验（如胆汁耐受性和45℃生长试验）[3][4]。
特别说明	叠氮化钠抑制革兰氏阴性菌，TTC显色剂增强肠球菌特异性识别；需注意假阳性（如嗜麦芽窄食单胞菌）的排除[8][10]。

2. DB37/T 4153-2020《水质肠球菌的测定酶底物法》

适用范围	山东省地方标准，专用于地表水、地下水及废水中肠球菌的快速检测[3]。
核心检测方法	基于β-葡萄糖苷酶底物反应，肠球菌分解特定底物产生荧光信号，结合定量PCR技术进行定量[3]。
检出限与定量限	最低检出限为0.1 MPN/mL，定量范围1-1000 MPN/mL[3]。
质控样品要求	需包含空白对照、加标回收样（添加标准菌株）及平行样，回收率应达70-130%[3]。
关键实验步骤	样品前处理（过滤浓缩）、酶底物反应（37℃孵育4小时）、荧光信号读取及数据分析[3]。
特别说明	该方法与滤膜法互补，适用于高通量检测，但需专用仪器且成本较高[3][8]。

3. 《食品安全国家标准饮用天然矿泉水检验方法》

适用范围	涵盖矿泉水等包装饮用水的微生物指标检测，包含肠球菌滤膜法检测流程[4]。
核心检测方法	规定使用KF琼脂或mEI琼脂，明确滤膜培养后的菌落形态特征（直径0.5-2 mm红色菌落）[4][8]。
质控样品要求	新增“等效标准菌株”概念，允许使用不同编号但特性一致的标准菌株进行质量控制[4]。
关键实验步骤	特别强调45℃耐热试验：挑取可疑菌落接种BHI肉汤，45℃培养48小时确认生长能力[4]。
特别说明	新版标准强化了方法等效性，允许实验室在验证后采用等效国际标准（如ISO 7899-2）[4][8]。

[3] 肠球菌标准-分析测试百科网 [4] GB 8538-2022《食品安全国家标准饮用天然矿泉水检验方法》 [8] 饮用水中肠球菌筛选培养基特异性的比较及检测标准评价_刘单单 [10] 滤膜检测标准-分析测试百科网

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