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精氨酸葡萄糖斜面琼脂(AGS)/用于霍乱弧菌的复合生化试验_
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精氨酸葡萄糖斜面琼脂(AGS)/用于霍乱弧菌的复合生化试验

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精氨酸葡萄糖斜面琼脂(AGS)介绍:

用途:用于霍乱弧菌的复合生化试验。

成分(g/L)

蛋白胨5.0
胰蛋白胨10.0
酵母浸粉3.0
氯化钠20.0
葡萄糖1.0
L-精氨酸5.0
柠檬酸铁铵0.5
硫代硫酸钠0.3
溴甲酚紫0.02
琼脂13.5
pH值6.9±0.125℃

检验原理:

蛋白胨、胰蛋白胨、酵母浸粉提供氮源维生素、生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖为可发酵糖类,产酸使溴甲酚紫指示剂变黄;硫代硫酸钠可被某些细菌还原硫化氢,与柠檬酸铁铵中的铁盐生成黑色硫化铁;琼脂是培养基凝固剂;溴甲酚紫为pH指示剂。

用法:

称取本品58.3g,加热煮沸溶解于1000ml蒸馏水中,分装于试管,121℃高压灭菌15分钟,备用。

注:培养基中含少量柠檬酸铁铵,灭菌后可能出现微量黑色沉淀。

精氨酸葡萄糖斜面琼脂的微生物质控结果:

金黄色葡萄球菌:上层紫色,下层紫色;霍乱弧菌非01群:上层紫色,下层黄色;

副溶血性弧菌:上层紫色,下层黄色。

精氨酸葡萄糖斜面琼脂微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用,不用于人体及临床诊断。

一、适用范围
SN/T 1022-2010《进出口食品中霍乱弧菌检验方法》规定,精氨酸葡萄糖斜面琼脂(AGS)主要用于霍乱弧菌的复合生化试验,适用于食品、环境样本及临床标本中霍乱弧菌的分离与鉴定[1][8]。
二、核心检测方法
依据SN标准,AGS检测需通过斜面接种法,结合精氨酸脱羧酶试验和葡萄糖发酵反应,观察细菌代谢产物的颜色变化(如溴甲酚紫指示剂变色)以判断霍乱弧菌的生化特性[1][8]。
三、检出限与定量限
SN标准未明确检出限,但要求培养基对霍乱弧菌的灵敏度需达到典型菌落形态(如黄色菌落)的可识别水平。定量限需通过标准菌株(如ATCC 14035)的梯度稀释验证[1][8]。
四、质控样品要求
质控需使用霍乱弧菌标准菌株(如ATCC 14035)和阴性对照菌株(如大肠埃希氏菌ATCC 25922)。标准菌株应呈现典型反应(精氨酸脱羧阳性,葡萄糖发酵阳性),阴性菌无反应[1][8]。
五、关键实验步骤
1. 培养基制备:按配方称取蛋白胨、L-精氨酸、葡萄糖等成分,调整pH至6.8-7.0,高压灭菌后倾注斜面;
2. 接种:取疑似菌落穿刺斜面并表面划线;
3. 培养:36±1℃培养18-24小时,观察颜色变化(紫色→黄色为阳性)[1][8]。
六、特别说明
1. AGS需避光保存,开封后需密封防潮;
2. 培养基变色异常(如非紫色背景)应废弃;
3. 需结合血清学试验或其他分子检测方法确认结果[1][8]。

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