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副溶血性弧菌琼脂/用于副溶血性弧菌的选择性分离培养_
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副溶血性弧菌琼脂/用于副溶血性弧菌的选择性分离培养

HB4184 {{goodObj.price > 0 ? '¥' + goodObj.price : '咨询'}} ¥{{goodObj.sell_price || 0}} 咨询 250g {{inventory}} {{goodObj.date}} hopebio {{item.norm}} 见证书

副溶血性弧菌琼脂介绍:

用途:用于副溶血性弧菌的选择性分离培养。

成分(g/L)

蛋白胨酵母浸粉牛胆盐硫代硫酸钠氯化钠十六烷基硫酸钠柠檬酸钠蔗糖溴麝香草酚兰麝香草酚兰琼脂pH值8.6±0.110.05.05.010.020.00.210.020.00.040.0420.025℃

检验原理:

蛋白胨、酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠可刺激弧菌的生长;蔗糖是可发酵的糖类;牛胆盐、硫代硫酸钠、柠檬酸钠及较高的pH可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群;霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。

用法:

称取本品100.28g,加热煮沸溶解于1000ml蒸馏水中,冷至45-50℃左右时,倾入无菌平皿。

副溶血性弧菌琼脂微生物质控结果:

a:溶藻弧菌,b:霍乱弧菌(海水),c:非O1群霍乱弧菌,d:河流弧菌,e:创伤弧菌,f:副溶血性弧菌

副溶血性弧菌琼脂微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。

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一、适用范围

本标准适用于水产品及食物中毒样品中副溶血性弧菌的定性及定量检测,包括新鲜、冷藏、冷冻的海水或淡水鱼类、甲壳类、贝壳类和软体动物等生食水产品。其他食品可参照执行[1]。

二、核心检测方法

1. 增菌培养:使用3%氯化钠碱性蛋白胨水(APW)36℃±1℃增菌8-18小时[1][5]
2. 分离培养:采用TCBS琼脂或显色培养基进行选择性分离,37℃培养18-24小时[5][6]
3. 生化鉴定:包括氧化酶试验、TSI斜面反应、嗜盐性试验及溶血性试验[1][6]

三、检出限与定量限

定性检测灵敏度为1CFU/25g样品,定量检测范围10²-10⁷CFU/g。冷冻样品需延长增菌时间至24小时以提高检出率[1][5]。

四、质控样品要求

每批次实验应包含:
1. 阳性对照:ATCC 17802标准菌株
2. 阴性对照:非弧菌属菌株
3. 空白对照:无菌生理盐水
质控菌株需在TCBS琼脂上呈现典型蓝绿色菌落[5][6]

五、关键实验步骤

1. 样品处理:25g样品加225mL灭菌生理盐水均质,制备1:10稀释液[1][5]
2. 选择性分离:TCBS琼脂划线需间隔3mm以上,避免菌落融合[5]
3. 纯化培养:挑取可疑菌落至TSA-TTC培养基观察动力及纯度[6]
4. 确证试验:需完成7项关键生化试验(包括ONPG、MR-VP等)[6]

六、特别说明

1. 需在生物安全二级实验室操作,处理含溶血毒素菌株时需加强防护[1]
2. 夏季样品需4小时内完成前处理,冬季不超过6小时[5]
3. 对亚硝酸盐敏感样品需采用改良APW增菌液[6]

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