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四号琼脂/用于霍乱弧菌的选择性分离培养

HB4134

No.4 Agar Base

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250g

hopebio

见证书

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四号琼脂介绍：

用途:用于霍乱弧菌选择性分离培养。

添加剂：每瓶需配套添加1盒HB0123 1%亚碲酸钾溶液使用，每1000ml四号琼脂添加1mlHB0123。

成分(g/L)

蛋白胨	15.0
牛肉粉	5.0
氯化钠	5.0
亚硫酸钠	3.0
柠檬酸钠	10.0
牛胆粉	5.0
十二烷基硫酸钠	2.0
琼脂	15.0
庆大霉素	500IU
利凡诺	0.03
pH值8.6±0.2	25℃

检验原理：

蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；亚硫酸钠可刺激弧菌生长；柠檬酸钠、十二烷基硫酸钠、牛胆粉、利凡诺、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH 可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌；霍乱弧菌对酸性环境比较敏感，因此该pH 值可增强其生长；琼脂是培养基的凝固剂。

用法：

称取本品60.0g ,加热溶解于1000ml蒸馏水中,冷至50-55℃时,每1000ml培养基中加入无菌1%亚碲酸钾溶液1ml,混匀,倾入无菌平皿,备用。

注：无需高压灭菌。

四号琼脂基础微生物质控结果：

四号琼脂培养基

大肠埃希氏菌

四号琼脂培养基

非O1群霍乱弧菌

四号琼脂培养基

粪肠球菌

四号琼脂培养基

副溶血性弧菌

四号琼脂培养基

霍乱弧菌（海水）

四号琼脂微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养14-18小时。

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HB4129-6	碱性蛋白胨水（ASPW）（ISO21872-1：2017）Alkaline Saline Peptone Water	250g	用于弧菌选择性增菌培养（ISO21872-1：2017海产品弧菌检验）

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GB 1975—2010 食品添加剂琼脂标准解读

适用范围

该标准适用于以石花菜、江蓠等红藻类为原料制成的食品添加剂琼脂，规定了其理化性质、微生物指标及检测方法，间接为四号琼脂中琼脂成分的质量控制提供依据[3]。

核心检测方法

包括凝胶强度测定（500-650g/cm²）、pH值检测（8.5±0.2）、无菌性验证（25-28℃培养5天无细菌生长）及组分含量分析（如蛋白胨、氯化钠等）[1][3]。

检出限与定量限

未直接规定，但要求杂质总量≤5%，灰分≤5%，且通过无菌性试验确保无杂菌干扰[3][7]。

质控样品要求

需验证培养基的外观（淡绿色、无裂纹）、持水性（培养后无明显失水）及灵敏度（以霍乱弧菌为阳性对照，大肠杆菌为阴性对照）[1][4][7]。

关键实验步骤

1. 溶解与配制：加热溶解琼脂基础成分，冷却至50-55℃后加入亚碲酸钾溶液；
2. 倾注平板：无菌条件下分装并凝固；
3. 接种培养：划线接种后于36±1℃培养20-24小时[1][4][9]。

特别说明

1. 避免高压灭菌，防止庆大霉素等热敏成分失效；
2. 开封后需密封冷藏，防止干裂或污染；
3. 出现冷凝水需在洁净环境下处理，确保表面干燥[1][4][7]。

食品添加剂琼脂补充说明

适用范围

明确琼脂作为食品添加剂的感官、理化及微生物指标，间接规范四号琼脂中琼脂原料的纯度与安全性[2]。

核心检测方法

引用GB/T 601/602/603系列标准，涵盖pH测定、重金属检测及硫酸盐含量分析，确保琼脂符合食品级要求[2][3]。

[1] 四号琼脂配置和使用说明_培养基厂家 - 日水生物官网 [2] GB 1886.239-2016 食品安全国家标准食品添加剂琼脂 [3] 四号琼脂_资料介绍-仪器信息网 [4] 四号琼脂培养基(医疗) NO.4 Agar Medium HB4134-仪器信息网 [7] 四号琼脂对霍乱弧菌使用说明 - 道客巴巴 [9] 四号琼脂对霍乱弧菌使用说明免费阅读可下载-天天文库

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