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3%氯化钠三糖铁琼脂/用于副溶血性弧菌的三糖试验（GB标准）

HB4088-3

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250g

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3%氯化钠三糖铁琼脂介绍：

用途：用于副溶血性弧菌的三糖试验（GB标准）。

成分(g/L)

蛋白胨	15.0
酵母浸粉	3.0
牛肉浸粉	3.0
氯化钠	30.0
䏡胨	5.0
乳糖	10.0
葡萄糖	1.0
蔗糖	10.0
苯酚红	0.024
硫酸亚铁	0.2
硫代硫酸钠	0.3
琼脂	12.0
pH值7.4±0.2	25℃

检验原理：

蛋白胨、牛肉浸粉提供氮源、维生素、矿物质；乳糖、葡萄糖、蔗糖为可发酵糖类，其产酸时通过酚红指示剂测出，酸性呈黄色，碱性呈红色；硫代硫酸钠可被某些细菌还原为硫化氢，与硫酸亚铁中的铁盐生成黑色硫化铁；较高含量的氯化钠维持弧菌均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂。

用法：

称取本品91.5g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装于15mm×150mm试管中，121℃高压灭菌15分钟，制成斜面，斜面长4-5cm，底部深厚2-3cm，备用。

注：培养基中含少量硫酸亚铁铵，灭菌后可能出现少量黑色沉淀。

不同细菌在3%氯化钠三糖铁琼脂管中的生长特征：

3%氯化钠三糖铁琼脂微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养18-24小时。

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国家标准 GB 4789.28-2013 相关解读

适用范围

GB 4789.28-2013 规定了食品微生物学检验中培养基和试剂的质量控制要求，适用于三糖铁琼脂（TSI）在副溶血性弧菌等微生物生化特性鉴定中的标准化操作[7]。

核心检测方法

通过穿刺接种和斜面划线法观察微生物对糖类的发酵能力（乳糖、葡萄糖、蔗糖）、硫化氢生成及气体产生情况，结合颜色变化（酚红指示剂）判断菌株特性[7]。

检出限与定量限

标准未明确具体数值要求，但规定质控菌株应呈现典型反应（如大肠埃希氏菌 ATCC 25922 显示 A/A 反应且产气）[7]。

质控样品要求

需使用标准菌株验证：
1. 大肠埃希氏菌 ATCC 25922（斜面黄色/底部黄色，产气）
2. 肠炎沙门氏菌 CMCC(B)50335（斜面红色/底部黄色，产硫化氢）
3. 福氏志贺氏菌 CMCC(B)51572（斜面红色/底部黄色，无气体）[7]

关键实验步骤

1. 培养基配制：每升含蛋白胨20g、氯化钠30g、酚红0.024g，pH 7.4±0.2
2. 灭菌条件：121℃高压灭菌15分钟
3. 接种方法：先斜面划线再底层穿刺
4. 培养条件：36℃±1℃培养18-24小时[7]

特别说明

1. 培养基需避光保存于2-8℃，开封后需密封防潮
2. 接种后需同时观察斜面和底层的颜色变化及气泡产生
3. 副溶血性弧菌特征反应：斜面红色（碱性）、底层黄色（酸性），不产硫化氢[7]

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