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霍乱双糖铁琼脂(KIA)/用于霍乱弧菌的生化试验

HB4145

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250g

hopebio

见证书

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副霍乱弧菌
BNCC367882 | 见详情

霍乱双糖铁琼脂(KIA)介绍：

用途：用于霍乱弧菌的生化试验。

成分（g/L）

牛肉浸粉	3.0
酵母浸粉	3.0
䏡蛋白胨	15.0
蛋白胨	5.0
乳糖	5.0
葡萄糖	1.0
硫酸亚铁	0.2
氯化钠	20.0
硫代硫酸钠	0.3
琼脂	12.0
酚红	0.024
pH值7.4±0.2	25℃

检验原理：

牛肉浸粉、酵母浸粉、䏡蛋白胨、蛋白胨提供氮源、维生素和矿物质；乳糖、葡萄糖是可发酵的糖；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂。

用法：

称取本品64.5g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装于试管内的3/4左右高度，121℃高压灭菌15分钟，放置高层斜面，备用。

注：培养基中含少量硫酸亚铁，灭菌后可能出现微量沉淀。

霍乱双糖铁琼脂质控结果：

实验结果现象与说明：

1.霍乱弧菌非01群、副溶血性弧菌、溶藻弧菌斜面红/底层黄：发酵葡萄糖但不发酵乳糖，是不发酵乳糖的特征的菌类。2.大肠埃希氏菌斜面黄/底层黄：既发酵乳糖也发酵葡萄糖，产生大量的酸使整个培养基呈黄色，同时有产气现象。3.鼠伤寒沙门氏菌、普通变形杆菌斜面红/底层黄（部分区域黑色）：发酵葡萄糖但不发酵乳糖同时产生硫化氢，是产硫化氢不发酵乳糖特征。硫化氢的产生：这类菌能分解含硫氨基酸，生成硫化氢，硫化氢和培养基中的铁盐反应生成黑色的硫化亚铁沉淀。

霍乱双糖铁琼脂（KIA）微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养18-24小时。

霍乱双糖铁琼脂(KIA)相关产品：

产品货号	产品名称	产品规格	产品说明及用途
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HB4133-2	庆大霉素琼脂Gentamycin Agar	250g	用于霍乱弧菌的分离培养（GB标准）
HB4130-1	TCBS肉汤Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Broth	250g	用于致病性弧菌的选择性增菌培养
HB4129-6	碱性蛋白胨水（ASPW）（ISO21872-1：2017）Alkaline Saline Peptone Water	250g	用于弧菌选择性增菌培养（ISO21872-1：2017海产品弧菌检验）

以上信息仅供参考，请以实物批次为准！

一、适用范围

霍乱双糖铁琼脂(KIA)主要用于霍乱弧菌及其他肠道致病菌的生化鉴定，尤其适用于区分发酵乳糖与非发酵乳糖的细菌。该培养基通过观察细菌对葡萄糖、乳糖的发酵能力及硫化氢的产生，为临床和食品卫生检测提供依据[9]。

二、核心检测方法

1. 斜面与底层反应观察：细菌在斜面部分发酵乳糖产酸变黄，底层发酵葡萄糖产酸或产气；
2. 硫化氢检测：通过硫酸亚铁与硫化氢反应生成黑色沉淀判断；
3. 动力观察：穿刺接种后，沿穿刺线扩散表示有动力[9][10]。

三、检出限与定量限

1. 检出限：培养基可检测单个活菌，通过18-24小时培养后肉眼观察结果；
2. 定量限：需结合菌落计数法，选择30-100个菌落的稀释级进行定量分析[1][6]。

四、质控样品要求

1. 阳性对照：大肠埃希氏菌（斜面/底层均黄）、鼠伤寒沙门氏菌（斜面红/底层黑）；
2. 阴性对照：未接种培养基保持红色；
3. 质控频率：每批次培养基需进行质控试验[9][6]。

五、关键实验步骤

1. 培养基制备：64.5g干粉溶于1L蒸馏水，121℃灭菌15分钟，分装高层斜面；
2. 接种方法：穿刺底层并划线斜面；
3. 培养条件：36±1℃需氧培养18-24小时；
4. 结果判读：斜面颜色变化优先于底层观察[9][5]。

六、特别说明

1. 乳糖发酵延迟现象：部分菌株需延长培养至48小时；
2. 硫化氢假阳性：过量接种可能导致非特异性反应；
3. 培养基保存：开封后需密封防潮，保质期3年[9][3]。

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