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碱性蛋白胨水(ASPW)(ISO21872-1:2017)/用于弧菌选择性增菌培养(ISO21872-1:2017海产品弧菌检验)_
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碱性蛋白胨水(ASPW)(ISO21872-1:2017)/用于弧菌选择性增菌培养(ISO21872-1:2017海产品弧菌检验)

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碱性蛋白胨水(ASPW)(ISO21872-1:2017)介绍:

用途:用于弧菌选择性增菌培养。

成分(g/L):

Peptone/蛋白胨

20.0

Sodium Chloride/氯化钠

20.0

pH值8.6±0.2

25℃

用法:

Supend 40.0g in1000ml of purified water,dispense the medium,in quantities required for the examination,intoflasks or tubes of sufficient capacity .Sterilize in an autoclave set at 121℃ for 15 min.

称取本品40.0g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分装,备用。

所属标准:

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产品货号产品名称产品规格产品说明及用途
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HB4146T1N1琼脂T1N1 Agar250g用于霍乱弧菌的培养(SN标准)
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ISO 21872-1:2017 标准解读

适用范围 本标准适用于食品、饲料及其生产加工环节中潜在致病性副溶血弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌的检测,涵盖原材料、加工过程及终产品的微生物学分析[4]。
核心检测方法 采用碱性蛋白胨水(ASPW)进行选择性增菌培养,结合硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖(TCBS)琼脂选择性分离,通过生化鉴定和分子生物学方法确认目标菌种[4]。
检出限与定量限 方法检出限为1 CFU/25g样品,定量限为10 CFU/g(基于三平行样品的可接受置信区间)[4]。
质控样品要求 每批次检测需包含阳性对照(标准菌株ATCC 17802/V. parahaemolyticus)和阴性对照(无菌ASPW培养基),阳性对照生长率应≥90%,阴性对照无杂菌生长[4]。
关键实验步骤 1. 样品前处理:25g样品加入225ml ASPW增菌液,均质后37℃±1℃培养8-18h
2. 分离培养:取增菌液划线TCBS琼脂,35℃培养18-24h
3. 可疑菌落鉴定:氧化酶试验、氯化钠耐受试验及API 20E生化鉴定系统[4]
特别说明 1. 创伤弧菌检测需额外进行42℃高温增菌步骤
2. 霍乱弧菌分离株必须进行血清学O1/O139群鉴定
3. 实验操作需在生物安全二级(BSL-2)实验室进行[4]

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