双抗巧克力琼脂培养基/用于嗜血杆菌和奈瑟菌的培养
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胰酪大豆胨液体培养基(TSB)(中国药典)/一种通用的营养培养基,用于各种微生物的培养
HB4114-19 | 见证书
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沙氏葡萄糖液体培养基(中国药典)/用于霉菌和酵母菌的增菌培养
HB0253-71 | 见证书
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冻干兔血浆/用于金黄色葡萄球菌的血浆凝固酶试验(GB、SN标准)
HB4117-4 | 见证书
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胰酪大豆胨液体培养基(TSB)(中国药典)/一种通用的营养培养基,用于各种微生物的培养
HB4114-19 | 见证书
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沙氏葡萄糖琼脂(含氯霉素)(EP标准)/用于霉菌和酵母菌的分离培养
HB8407-2 | 见证书
用途:用于嗜血杆菌和奈瑟菌的培养。
添加剂:
每瓶需配套添加6盒HB8641a 双抗巧克力琼脂添加剂和1001339-1 脱纤维羊血;
每200ml双抗巧克力琼脂培养基需添加1支HB8641a 双抗巧克力琼脂添加剂和7%的1001339-1 脱纤维羊血(约14ml)。
成分(g/L)
检验原理:
各种消化物和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素和生长因子;玉米淀粉能促进奈瑟氏菌的生长;氯化钠维持均衡的渗透压;多粘菌素、万古霉素抑制革兰氏阳性菌的生长,更有利于嗜血杆菌和奈瑟菌的生长;琼脂是培养基的凝固剂;脱纤维羊血为苛养菌提供生长因子。
用法:
称取本品44g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装三角瓶,每瓶200ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每瓶加入7%无菌脱纤维羊血(约14ml),混匀,在 80℃水浴中加热10min左右(并不停摇动),直至培养基颜色变成棕色(巧克力色),冷至45-50℃时,加入一支双抗巧克力琼脂添加剂(含万古霉素0.66mg,多粘菌素B 0.84mg),混匀,倾入无菌平皿,备用。
双抗巧克力琼脂基础微生物灵敏度试验:
按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养18-24小时。
以上信息仅供参考,请以实物批次为准!
相关标准解读
1. 适用范围
双抗巧克力琼脂培养基主要用于嗜血杆菌和奈瑟菌的分离培养及增殖,适用于临床微生物检测、食品卫生检验等领域。其配方设计满足苛养菌对X因子和V因子的需求,通过高温裂解红细胞释放生长因子[2][4]。
2. 核心检测方法
检测方法基于选择性抑制原理,添加万古霉素和多粘菌素B抑制革兰氏阳性菌,通过巧克力化处理(80℃水浴加热)促进目标菌生长。培养基需无菌分装并添加5%-10%脱纤维羊血[3][4]。
3. 检出限与定量限
该培养基对嗜血杆菌的检出限为1 CFU/mL,定量限为10 CFU/mL,满足临床样本中低浓度病原体的检测需求。质控菌株(如流感嗜血杆菌ATCC 10211)需呈现典型菌落形态[4]。
4. 质控样品要求
每批次培养基需进行无菌试验(35℃培养24-48h)和生长试验,使用标准菌株验证性能。质控频度为每次新配制时,菌落形态应清晰可见(1.5-2mm),无杂菌污染[4][10]。
5. 关键实验步骤
① 基础成分溶解(44g/1000mL蒸馏水);② 121℃高压灭菌15分钟;③ 冷却至50℃添加羊血并巧克力化处理;④ 加入双抗添加剂(万古霉素和多粘菌素B);⑤ 倾注平板后2-8℃保存[3][4]。
6. 特别说明
① 培养基颜色需呈均匀巧克力棕色;② 添加剂需现配现用;③ 避免反复冻融;④ 失效表现为颜色异常或质控菌生长不良;⑤ 存储条件不符合可能导致V因子降解[3][4][10]。
以上信息仅供参考,请以相应标准的原文为准!