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培养基39(USP标准)(Medium 39)/用于抗生素效价测定_
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培养基39(USP标准)(Medium 39)/用于抗生素效价测定

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培养基39(USP标准)(Medium 39)介绍:

用途:用于抗生素效价测定。

成分(g/L)

Peptone/蛋白胨

5.0 g

Yeast Extract/酵母浸粉

1.5 g

Beef Extract/牛肉浸粉

1.5 g

Sodium Chloride/氯化钠

3.5 g

Dextrose/葡萄糖

1.0 g

Dibasic Potassium Phosphate/磷酸氢二钾

3.68 g

Monobasic Potassium Phosphate/磷酸二氢钾

1.32 g

pH after sterilization: 7.9± 0.1

用法:

Suspend 17.5g/liter, heat up and milling to dissolve,dispense in conical flask,autoclave at 121 ℃ for 15min.

称取本品17.5g,加热溶解于1000ml纯化水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,备用。  

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一、适用范围

USP药典《1117》章节规定了微生物实验室中培养基的质量控制、制备方法及适用范围,适用于药品、生物制品及相关原料的微生物限度检查和无菌检测[4]。

二、核心检测方法

1. 需氧菌总数检测:使用酪蛋白大豆消化琼脂培养基,在30-35℃培养≤3天,检测限≤100 CFU[3]。
2. 真菌检测:采用沙氏葡萄糖琼脂培养基,在20-25℃培养2-3天,需验证白色念珠菌和黑曲霉菌的生长特性[3][4]。

三、检出限与定量限

1. 需氧菌定量限:≤100 CFU/g(或mL),通过菌落计数法验证[3]。
2. 控制菌检测:致病菌(如铜绿假单胞菌)的检出限需满足1 CFU/10g样品,采用MPN法或选择性培养基富集[1][4]。

四、质控样品要求

1. 需使用ATCC标准菌株(如金黄色葡萄球菌ATCC 6538)进行促生长能力验证[3][4]。
2. 每批次培养基需进行灵敏度测试,菌液浓度控制在10-100 CFU/mL[4]。

五、关键实验步骤

1. 培养基配制:准确称量脱水培养基,使用纯化水溶解,加热时避免过度焦化[4]。
2. 灭菌处理:湿热灭菌需控制121℃±1℃,维持15-20分钟,灭菌后pH值变化不超过±0.2[4]。

六、特别说明

1. 不同培养基的贮存条件需严格遵循说明书,液体培养基建议2-8℃避光保存且不超过7天[4]。
2. 检测含抑菌成分的样品时,需进行中和剂验证或增加稀释步骤以避免假阴性结果[4]。

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