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RV沙门菌增菌液体培养基（USP标准）(Rappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth)/用于沙门氏菌选择性增菌培养

HB4198-22

Rappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth

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250g

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RV沙门菌增菌液体培养基（USP标准）(Rappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth)介绍：

用途：用于沙门氏菌选择性增菌培养。

成分(g/L)

Soya peptone / 大豆蛋白胨	4.5
Magnesium Chloride Hexahydrate /六水合氯化镁	29.0
Sodium Chloride / 氯化钠	8.0
Dipotassium Phosphate / 磷酸氢二钾	0.4
Potassium Dihydrogen Phosphate / 磷酸二氢钾	0.6
Malachite Green / 孔雀石绿	0.036
pH值5.2 ± 0.2	25℃

培养基组分说明 除了微生物生长必须的碳源、氮源外，还有孔雀绿和六水合氯化镁。孔雀绿的主要用途是抑制杀灭真菌、大肠菌群；六水合氯化镁的用途是抑制变形杆菌和大肠杆菌的生长。在这里，美国药典和欧洲药典并未说明不同培养基组分的混合顺序，但是中国药典明确了除了孔雀绿外，其他要先混合溶解，之后才加入孔雀绿，然后进行灭菌。原因是：孔雀绿为有毒的致癌物，尽量减少与之接触。不过，除了培养基生产企业，现在的药厂都是购买成品干粉或颗粒培养基，按照供应商的说明书，直接称取相应的干粉或颗粒重量，加入纯化水即可。另外，这里需要注意的是，与其他常用的培养基的灭菌条件121℃不同的是，该培养基灭菌温度为不超过115℃。那为什么会不一样呢，原因在于六水合氯化镁。六水氯化镁又名水氯石、结晶氯化镁、卤片、卤粉，英文名magnesium chloride hexahydrate，分子量203。常温下为无色单斜晶体，呈柱状或针状或片状，有苦味，密度1.56g/cm3，易溶于水和乙醇，在湿度较大时，容易潮解。在空气中加热分解： 100℃时失去2分子结晶水；在110℃开始失去部分氯化氢而分解，强热转为氧氯化物；

在熔点118℃时热熔分解，释放出HCl气体而变成氯氧化合物；高温下加热则分解为MgO和HCl。

由上可知，该培养基不能用常规的121℃进行灭菌，所以药典规定了115℃灭菌。

用法：

Suspend 27.1 g/liter,dispense into tubes,autoclave 20 min at 115℃.

称取本品 27.1g,加热搅拌溶解于 1000ml 纯化水中,分装试管,115℃高压灭菌 20 分钟,备用。

在RV沙门增菌液体培养基中，鼠伤沙门氏菌为浑浊；肠炎沙门氏菌为浑浊；

乙型副伤寒沙门菌为浑浊；大肠埃希氏菌为抑制或部分抑制；金黄色葡萄球菌为抑制。

RV沙门菌增菌液体培养基（USP标准）微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置30-35℃需氧培养18-24小时。

RV肉汤的原理和使用方法:

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

一、适用范围

适用于药品、食品及环境样品中沙门氏菌的选择性增菌培养，符合中国药典、美国药典及欧洲药典对沙门氏菌检测的规范性要求[3]。

二、核心检测方法

基于选择性抑制原理，通过孔雀绿染色剂、高渗透压（氯化镁）及低pH环境抑制非目标菌，大豆胨或化学合成氮源提供营养支持。检测方法包括样品预处理、选择性增菌培养及目标菌分离鉴定[5][3]。

三、检出限与定量限

未明确具体数值，但培养基设计可支持沙门氏菌在初始浓度≥1 CFU/10g样品中的有效增殖，抑制常见干扰菌如大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌[5]。

四、质控样品要求

需使用标准菌株（如鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌）验证增菌效果，同时以大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌作为阴性对照，确保培养基选择性符合要求[4][5]。

五、关键实验步骤

1. 配制：称取27.1g干粉溶于1L纯化水，煮沸溶解后分装；
2. 灭菌：115℃高压灭菌15-20分钟，避免高温破坏选择性成分；
3. 接种：取预增菌样品0.1mL接种至10mL培养基，41.5℃培养18-24小时[5][4]。

六、特别说明

1. 培养基pH需严格控制在5.2±0.2，确保选择性；
2. 禁止使用含植物源性成分（如大豆胨）的替代品，以免影响检测重现性；
3. 灭菌后需冷却至常温再使用，避免热应激影响目标菌活性[3][5]。

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