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绿脓菌素测定用培养基(USP标准)(Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin)/用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验_
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绿脓菌素测定用培养基(USP标准)(Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin)/用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验

HB5187-2 Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin {{goodObj.price > 0 ? '¥' + goodObj.price : '咨询'}} ¥{{goodObj.sell_price || 0}} 咨询 250g {{goodObj.date}} hopebio {{item.norm}} 见证书 {{inventory}}
绿脓菌素测定用培养基(USP标准)(Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin)介绍:

用途:用于绿脓杆菌的绿脓菌素测定试验。

成分(g/L)

Pancreatic Digest of Gelatin/明胶蛋白胨 20.0
Anhydrous Magnesium Chloride/氯化镁 1.4
Anhydrous Potassium Sulfate/硫酸钾 10.0
Agar/琼脂 15.0
pH值7.2 ± 0.2 25℃

检验原理:蛋白胨和甘油提供碳氮源;氯化镁和硫酸钾促进绿脓色素和荧光素的产生;琼脂是培养基的凝固剂。

用法:

Suspend 46.4g of the medium in one  liter of purified water containing10g of glycerol.  Heat , with  frequent agitation, and boil for 1 minute. Autoclave 15 min  at  121°C. 称取本品 46.4g,另称取 10g甘油,加热煮沸溶解于1000ml纯化水中,分装 ,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。

注:培养基中含少量氯化镁,灭菌后可能出现微量沉淀。

绿脓菌素生成试验方法及原理:

方法:挑取可疑菌落接种在在绿脓菌素测定用培养基(PDP)斜面上,培养24小时,观察斜面有无色素。如有色素,在试管内加氯仿3.0~5.0mL,充分震摇,使培养物中的绿脓菌素提取在氯仿中,待氯仿提取液呈现绿色时,加1mol/L盐酸约1mL,震摇后静置片刻,上层盐酸溶液中呈现粉红至红色实验结果为阳性,否则为阴性。

原理:铜绿假单胞菌能产生的绿脓菌素能被氯仿提取,且在水中溶解度比氯仿大,并且会发生可逆的氧化还原反应,氧化时碱性呈蓝色,酸性呈红色。所以加入盐酸溶液并震摇后,绿脓菌素会由氯仿转移至盐酸溶液中,并在酸性环境中呈红色。

绿脓菌素测定用培养基中细菌的生长特征:

绿脓菌素测定(PDP)试验流程及现象:

绿脓菌素测定(PDP)试验操作视频:

绿脓菌素测定用培养基(USP)微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24±2小时。

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绿脓菌素测定用培养基(USP标准)解读
适用范围 用于鉴别铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)产生绿脓菌素的检测试验,适用于药品、化妆品及医疗器械等微生物检验领域[7]。
核心检测方法 采用斜面培养法:将样品接种于培养基后,30-35℃培养24小时,通过观察培养基颜色变化(变绿色)及氯仿抽提液显色反应进行判定[7]。
检出限与定量限 可特异性检测铜绿假单胞菌产生的绿脓菌素,灵敏度满足USP要求,阳性菌株培养后可见典型绿色色素扩散[7]。
质控样品要求 需使用铜绿假单胞菌CMCC10104作为阳性对照,应生长良好且显色符合标准;阴性对照不得出现干扰性显色反应[7]。
关键实验步骤 1. 培养基配制:每升水加45.4g干粉及10g甘油,煮沸溶解后分装灭菌
2. 接种:斜面凝固后划线接种待测菌
3. 培养:30-35℃培养24小时后观察显色
4. 验证:加氯仿抽提液进行显色确认[7]
特别说明 · 培养基含氯化镁(1.4g/L)和硫酸钾(10g/L)促进色素生成
· pH需严格控制在7.3±0.1
· 灭菌后需立即制成斜面以防成分降解[7]

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