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基体/乳粉中亚硝酸盐/GB 5009.33-2016 第二法
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基体/乳粉中亚硝酸盐/GB 5009.33-2016 第二法

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标准名称及标准号
《食品安全国家标准 食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定》
GB 5009.33-2016 第二法（分光光度法）
适用范围
适用于乳粉、液态乳、乳制品等食品基体中亚硝酸盐的定量检测，尤其针对复杂基体样品中低含量亚硝酸盐的测定。
核心检测方法
采用分光光度法，基于亚硝酸盐在酸性条件下与对氨基苯磺酸重氮化后，与盐酸萘乙二胺偶联生成紫红色化合物，在波长538 nm处测定吸光度值。
检出限与定量限
亚硝酸盐检出限：1 mg/kg
定量限：3 mg/kg（以乳粉基体计）
质控样品要求
1. 每批次检测需包含空白对照与平行样（平行双样绝对差值≤10%）
2. 加标回收率应控制在85%-105%范围
3. 使用有证标准物质进行校准验证
关键实验步骤
1. 试样处理：采用热水超声提取，加入亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀蛋白
2. 显色反应：调节pH至1.9，依次加入显色剂避光反应20分钟
3. 比色测定：用1 cm比色皿在538 nm处测定吸光度，扣除试剂空白值
特别说明
1. 高脂肪样品需增加脱脂步骤防止乳化
2. 显色反应需严格控制温度（20-25℃）和时间（20±2分钟）
3. 标准曲线需覆盖检测范围且相关系数R²≥0.999

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