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溶菌酶肉汤基础/用于蜡样芽孢杆菌的溶菌酶试验

HB8699

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250g

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溶菌酶肉汤基础介绍：

用途:用于蜡样芽孢杆菌的溶菌酶试验。

添加剂：每瓶需配套添加 HB8699a 0.1%溶菌酶溶液使用，每支添加于99ml溶菌酶肉汤基础中。

成分(g/L)：

牛肉浸粉	3.0
蛋白胨	5.0
pH值6.8 ± 0.1	25℃

用法

称取本品8.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装于烧瓶中,每瓶99ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每瓶中加入0.1%溶菌酶溶液1ml,混匀后分装无菌试管,每管2.5ml,备用。

注：溶菌酶溶液制备：在65ml 灭菌的0.1mol/L盐酸中加入0.1g溶菌酶,煮沸20分钟溶解后,再用灭菌0.1mol/L盐酸稀释至100ml。

不同细菌在溶菌酶肉汤基础上的生长特征：

溶菌酶肉汤基础微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养24-48小时。

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GB/T 30990-2014《溶菌酶活性检测方法》解读

适用范围

适用于食品、饲料、医药等领域中溶菌酶活性的定量检测[8]。

核心检测方法

采用分光光度法，通过测量溶菌酶对微球菌细胞壁的裂解作用引起的吸光度变化，计算酶活性单位[8]。

检出限与定量限

检出限为0.1 μg/mL，定量限为0.5 μg/mL，确保低浓度样品的准确测定[8]。

质控样品要求

需使用标准溶菌酶样品进行校准，活性单位应在标定范围内，并定期验证稳定性[8]。

关键实验步骤

包括底物悬浮液制备、酶反应体系构建（37℃水浴10分钟）、离心后测定260nm吸光度值[8]。

特别说明

实验需在恒温条件下进行，避免温度波动导致酶活性偏差；使用前需校准分光光度计[8]。

GB 1886.257-2016《食品安全国家标准食品添加剂溶菌酶》解读

适用范围

规范食品添加剂溶菌酶的生产、检验及质量控制，适用于鸡蛋清来源的溶菌酶产品[4]。

核心检测方法

酶活力测定采用分光光度法，pH值检测使用电极法，微生物指标按GB 4789系列标准执行[4]。

检出限与定量限

酶活力定量限≥1000 U/mg，水分含量检出限≤5.0%，灰分≤2.0%[4]。

质控样品要求

每批次需检测酶活力、水分、灰分及微生物（大肠菌群、沙门氏菌等）指标[4]。

关键实验步骤

酶活力测定时需精确控制反应温度（25±0.5℃）和时间（5分钟），使用pH 6.24标准缓冲液校准[4]。

特别说明

样品应密封避光储存于阴凉干燥处，开封后需尽快使用以防止吸湿失活[4]。

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