0.5%碱性复红溶液/作为蜡样芽孢杆菌蛋白质毒素结晶试验用的染色液使用_培养基_菌种_标准物质_萘析商城

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0.5%碱性复红溶液/作为蜡样芽孢杆菌蛋白质毒素结晶试验用的染色液使用

HB8769

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5ml*4

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0.5%碱性复红溶液介绍：

用途：作为蜡样芽孢杆菌蛋白质毒素结晶试验用的染色液使用。

试剂盒组成：

组成	规格	配制依据
0.5%碱性复红溶液	5ml*4	取碱性复红0.5g碱性复红，溶解于20mL乙醇中，再用蒸馏水稀释至100ml。

蛋白质毒素结晶试验：

挑取纯培养的单个可疑菌落接种于硫酸锰营养琼脂平板上，30℃±1℃培养24h±2h，并于室温放置3d ～4d ，挑取培养物少许于载玻片上，滴加蒸馏水混匀并涂成薄膜。经自然干燥，微火固定后加甲醇作用30s后倾去，再通过火焰干燥，于载玻片上滴满0.5%碱性复红，放火焰上加热（微见蒸气，勿使染液沸腾)持续1min～2min，移去火焰，再更换染色液再次加温30s，倾去染液用洁净自来水彻底清、晾干后镜检。观察有无游离芽胞（浅红色）和染成深红色的菱形蛋白结晶体。如发现游离芽孢形成的不丰富，应再将培养物置室温2d-3d后进行检查。除苏云金芽孢杆菌外，其他芽孢杆菌不产生蛋白结晶体。

不同细菌在0.5%碱性复红溶下的生长特征：

①深红色菱形或方形晶体为伴孢晶体；②芽孢体：一般很难着色；

③苏云金芽孢杆菌菌：有游离芽孢，染成深红色的菱形蛋白结晶体。

0.5%碱性复红溶液微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置/℃/培养/小时。

0.5%碱性复红使用方法及现象：

0.5%碱性复红溶液相关产品：

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GB 4789.28-2013《食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》解读

适用范围

本标准规定了食品微生物学检验中培养基和试剂的质量控制要求，适用于食品安全监管机构、检测实验室对微生物检测试剂的制备与验证，包含0.5%碱性复红溶液的配制与质控[4]。

核心检测方法

染色步骤

0.5%碱性复红溶液用于蜡样芽孢杆菌蛋白质毒素结晶试验，通过加热染色（微见蒸气）1-2分钟，观察菱形结晶体的显色反应，区分苏云金芽孢杆菌与其他芽孢杆菌[4][5]。

检出限与定量限

灵敏度要求

染色液需确保对目标菌株（如蜡样芽孢杆菌）的伴孢晶体显色清晰，检出限需满足单菌落水平检测需求，定量限未明确但需符合染色液稳定性指标[4][7]。

质控样品要求

保存与验证

染色液需避光保存于2℃-8℃，开封后需标注有效期（通常≤6个月）；使用前需通过阳性菌株（如苏云金芽孢杆菌）验证染色效果[4][7]。

关键实验步骤

配制与灭菌

取0.5g碱性复红溶解于20mL乙醇后定容至100mL，过滤除菌；避免高温灭菌以免成分分解[4][7]。

特别说明

干扰因素

染色时间过长可能导致背景色过深，需严格控制加热温度（微见蒸气）；陈旧培养物需延长室温放置时间至3-4天以提高检测灵敏度[4][5]。

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