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蜡样芽孢杆菌选择性琼脂基础/用于蜡样芽孢杆菌的选择性分离培养

HB0280

Bacilus Cereus Selective Agar Base

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250g

hopebio

见证书

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蜡样芽孢杆菌选择性琼脂基础介绍：

用途：用于蜡样芽胞杆菌的选择性分离培养

添加剂：每瓶需配套添加12盒 HB0248a 多粘菌素B和12盒 HB8295 50%卵黄乳液使用，每100ml蜡样芽孢杆菌选择性琼脂培养基基础中添加1支HB0248a和2支HB8295。

成分（g/L）

胰酪蛋白胨	10.0
牛肉浸粉	1.0
D-甘露醇	10.0
氯化钠	10.0
苯酚红	0.025
琼脂	12.0
pH值7.2±0.2	25℃

检验原理：

胰酪蛋白胨、牛肉浸粉提供微生物生长的基本营养，D-甘露醇为唯一可发酵糖类，蜡样芽胞杆菌不发酵甘露醇，菌落一般为橙红色或粉红色，而发酵甘露醇的细菌因产酸而显黄色，蜡样芽胞杆菌可产生卵磷脂酶，分解卵黄，在菌落周围产生沉淀环；氯化钠维持均衡的渗透压；苯酚红作为酸碱指示剂；琼脂为凝固剂。

用法：

称取本品43.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装每瓶100ml，121℃高压灭菌15分钟，冷至50℃左右时，每瓶加入10ml 50%的无菌卵黄乳液和多粘菌素B10000IU，混匀，倾入无菌平皿，备用。

蜡样芽孢杆菌选择性琼脂基础(盲样分离)：


蜡样芽胞杆菌(食品分离) 菌落为微粉红色，周围有淡粉红色沉淀环	蜡样芽胞杆菌(环境分离) 菌落为微粉红色，周围有淡粉红色沉淀环

蜡样芽孢杆菌选择琼脂基础的微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养24-48小时。注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。

蜡样芽孢杆菌选择性琼脂基础相关产品：

产品货号	产品名称	产品规格	产品说明及用途
HB9204	液化GYE琼脂培养基Liquefaction GYE Agar Medium	250g	用于凝结芽孢杆菌的计数培养
HB0248	甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础（MYP）Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base	250g	用于蜡样芽孢杆菌的固体平板计数（GB、SN标准)
HB0250	改良V-P培养基V-P Medium,Modified	250g	用于蜡样芽孢杆菌的V-P试验
HB0251-1	胰酪胨大豆羊血（TSSB）琼脂Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base	250g	用于蜡样芽孢杆菌的溶血测试实验
HB0252	酪蛋白琼脂Casein Agar	250g	用于蜡样芽孢杆菌的酪蛋白分解试验
HB9258	检测培养基Detection Medium	250g	用于凝结芽孢杆菌计数和培养
HB9195	酸水解酪蛋白胰蛋白胨（HCT）琼脂培养基Hydrolysate 0f Casein Tryptone(HCT)Agar Medium	250g	用于检测苏云金杆菌的伴孢晶体
HB9219	葡萄糖酵母琼脂培养基Glucose Yeast Agar Medium	250g	用于凝结芽孢杆菌培养
HBPM0251	胰酪胨大豆羊血琼脂（TSSB）平板（9cm）(2-8℃)	9cm*5/包	用于蜡样芽胞杆菌的分离、培养和溶血试验
HB9259	甘露醇卵黄多粘菌素肉汤Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Broth	250g	用于蜡样芽孢杆菌选择性增菌培养
HB8925-1	凝结芽孢杆菌检测培养基Coagulation Bacillus Detection Medium	250g	用于凝结芽孢杆菌培养
HBPT8501	NAC液体培养基管（9ml）NAC Solid Medium	9ml*20	用于绿脓假单胞菌的增菌培养
HBPT8501-1	NAC液体培养基管（9ml） NAC Solid Medium	9ml*20	用于绿脓假单胞菌的增菌培养
HB0276	酚红葡萄糖肉汤Phenol Red Dextrose Broth	250g	用于蜡样芽孢杆菌葡萄糖分解试验
HB0277	硝酸盐肉汤Nitrate Broth	250g	用于蜡样芽孢杆菌硝酸盐还原试验
HB0278	动力-硝酸盐培养基（A法）Motility Nitrate Medium	250g	用于细菌的动力试验和硝酸盐还原试验
HB0279	木糖-明胶培养基Xylose - gelatin medium	250g	用于蜡样芽孢杆菌明胶液化试验
HB0281	葡萄糖酪胨琼脂Dextrose Casein-peptone Agar	250g	用于食品中腊样芽孢杆菌鉴定和计数（APHA方法）
HB8925	凝结芽孢杆菌计数培养基Coagulation Bacillus Count Medium	250g	用于凝结芽孢杆菌的计数培养
HB0248a	多粘菌素B（1万单位）Polymyxin B	1万单位*5支	添加于100mlHB0249或HB0280或HB0248-1或HB0248中
HB8699	溶菌酶肉汤基础Lysozyme Broth Base	250g	用于蜡样芽孢杆菌的溶菌酶试验
1001339-1	脱纤维羊血Off fiber sheep blood	50ml	每100mlHB0251中加入7ml脱纤维羊血
HB0249b	多粘菌素B（2.25万单位）	2.25万单位*5支	每支添加于225ml胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础中
HBJ016	含225mL胰酪胨大豆多粘菌素肉汤均质袋	10个/盒	用于蜡样芽孢杆菌的前增菌培养（GB)
GB179	D-甘露醇发酵管（枯草芽孢杆菌）	20支	用于枯草芽孢杆菌生化试验
GB180	丙酸盐（枯草芽孢杆菌）	20支	用于枯草芽孢杆菌生化试验
HB0249-1	胰酪胨大豆多粘菌素肉汤基础Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base	250g	用于蜡样芽孢杆菌选择性的增菌培养
HB8480	肝汤Liver Broth	250g	用于嗜热菌芽孢的鉴别培养
HB8500	NAC琼脂培养基NAC Agar Medium	250g	用于绿脓假单胞菌的分离培养
HB8501	NAC液体培养基NAC Solid Medium	250g	用于绿脓假单胞菌的增菌培养
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HB8699a	0.1%溶菌酶溶液	1ml*5	每支添加于99ml溶菌酶肉汤基础中
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HB8699-1	溶菌酶营养肉汤Lysozyme Nutrient Broth	250g	用于蜡样芽胞杆菌溶菌酶试验（GB4789.14-2014）
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HB4168-6	动力培养基Motility Test Medium	250g	用于动力试验
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HBPM0252	酪蛋白琼脂平板（9cm)Casein Agar Plate	9cm*10个/包	用于蜡样芽孢杆菌的酪蛋白分解试验
HB0115-1	西蒙氏柠檬酸盐培养基Simmons Citrate Medium	250g	用于蜡样芽孢杆菌利用柠檬酸盐试验
HB8769	0.5%碱性复红溶液	5ml*4	作为蜡样芽孢杆菌蛋白质毒素结晶试验用的染色液使用

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一、适用范围

本标准（GB4789.14-2014）适用于食品中蜡样芽孢杆菌的定性及定量检测，涵盖肉制品、乳制品、谷物制品等各类食品基质[5]。

二、核心检测方法

采用选择性琼脂培养基分离法：
1. 第一法：常规计数法（菌落形成单位计数）
2. 第二法：MPN法（最可能数法），适用于低污染样品检测[5]

三、检出限与定量限

定量检测限≥10 CFU/g，定性检出限为1 CFU/25g。食品安全风险阈值设定为≥10⁵ CFU/g[5][8]

四、质控样品要求

每批次实验需包含：
• 阳性对照：蜡样芽孢杆菌标准菌株（ATCC 11778）
• 阴性对照：枯草芽孢杆菌标准菌株
• 空白对照：无菌生理盐水[5]

五、关键实验步骤

1. 样品前处理：25g样品+225mL稀释液均质
2. 选择性培养：接种MYP琼脂（甘露醇卵黄多粘菌素琼脂）
3. 培养条件：30±1℃需氧培养24±2h
4. 菌落验证：典型菌落进行革兰氏染色、动力试验及生化鉴定[5][8]

六、特别说明

1. 需区分蜡样芽孢杆菌与苏云金芽孢杆菌等近缘种
2. 检测含防腐剂样品时需增加中和剂
3. 培养基配制后应在2-8℃避光保存，有效期7天[5][9]

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