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硫酸锰营养琼脂培养基/用于需氧芽孢杆菌的芽孢培养

HB4177-1

Manganese Nutrient Agar Medium

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250g

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硫酸锰营养琼脂培养基介绍：

用途：用于需氧芽孢杆菌的芽孢培养。

成分（g/L）：

硫酸锰	0.0308
胰蛋白胨	5.0
酵母浸粉	5.0
葡萄糖	5.0
磷酸氢二钾	4.0
琼脂	13.0
pH值7.2±0.2	25℃

用法：

称取本品32.03g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121℃高压灭菌15分钟，备用。

注：培养基中含少量硫酸锰，灭菌后可能出现微量沉淀。

检验原理：

胰蛋白胨和酵母浸粉作为培养基中的基础营养物质，提供细菌生长所需的碳氮源、维生素和其他的生长因子；葡萄糖为可发酵糖类；磷酸二氢钾作为培养基的缓冲剂；硫酸锰可促进芽孢的生成；琼脂是培养基的凝固剂。

不同细菌在硫酸锰营养琼脂上的生长特征：

硫酸锰营养琼脂原理和使用方法：

硫酸锰营养琼脂培养基 微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置30±1℃需氧培养24±2小时。

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标准解读

适用范围

本标准适用于食品中蜡样芽胞杆菌的分离与鉴定，包括蛋白质毒素结晶体检测。硫酸锰营养琼脂培养基用于促进芽胞形成及毒素结晶体的观察[3][9]。

核心检测方法

方法要点

通过选择性培养基培养后，观察菌落形态、芽胞形成及蛋白质毒素结晶体的特征性结构。需结合生化试验（如溶血试验、动力试验）进行综合鉴定[3][9]。

检出限与定量限

检测灵敏度

培养基对目标菌株的最低检出限为1 CFU/g（按标准稀释法操作），定量限需结合菌落计数方法，确保可重复性符合国标要求[3][9]。

质控样品要求

质控菌株

需使用苏云金芽胞杆菌（ATCC10792）和蜡样芽胞杆菌（ATCC63301）作为阳性对照，验证培养基的促芽胞形成能力及毒素结晶体特征[3][9]。

关键实验步骤

操作流程

1. 样品预处理：按标准进行均质和梯度稀释。
2. 接种培养：取稀释液涂布于硫酸锰营养琼脂平板，30℃±1℃培养24h后室温放置3-4天。
3. 镜检观察：挑取典型菌落进行革兰染色及芽胞、结晶体形态学鉴定[3][9]。

特别说明

注意事项

- 培养基配制后需121℃高压灭菌15分钟，避免过度加热导致成分降解。
- 实验废弃物需经121℃高压灭菌30分钟后再处理，防止生物污染[3][9]。

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