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冻干兔血浆/用于金黄色葡萄球菌的血浆凝固酶试验（GB、SN标准）

HB4117-4

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0.5ml*10

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见证书

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HB4117-4 | 见证书
金黄色葡萄球菌
BNCC271626 | 见详情

冻干兔血浆介绍：

【产品名称】

通用名称：冻干兔血浆

【包装规格】

0.5ml×10支

【预期用途】

用于金黄色葡萄球菌的血浆凝固酶试验（GB、SN标准）。

【检验原理】

细菌生成血浆凝固酶后释放于血浆中，称为游离凝固酶，不直接作用到血浆纤维蛋白原上，而是被血浆中的致活剂（即凝固酶致活因子）激活后变成耐热的凝固酶样物质，此物质纤维蛋白原变为固态纤维蛋白，血浆因而凝固。致病性葡萄球菌能产生凝固酶。

【主要组成成份】

冻干兔血浆、柠檬酸钠。

【储存条件及有效期】

1.2℃-25℃避光保存，环境湿度≤80%。

2.在储存条件下有效期为一年。

【样本要求】

样本的收集、储存、处理、运输应严格执行无菌操作，避免污染，

【检验方法】

方法1：按箭头方向掀开并撕下铝箔盖，每支西林瓶中加入0.5ml灭菌生理盐水轻微摇晃至完全溶解，然后加入0.3ml（SN)）或0.2ml-0.3ml（GB）肉汤培养物，充分混合后，置36℃±1℃培养。

方法2：按箭头方向掀开并撕下铝箔盖，每支西林瓶中加入0.8ml肉汤培养物轻微摇晃至完全溶解，置36℃±1℃培养。

【参考值（参考范围）】

本品的空白对照应无菌生长。

【检验结果的解释】

每半小时观察一次，观察6 h，如呈现凝固（即倾斜或倒置时，呈现凝块）或凝固体积大于原体积的一半，被判定为阳性结果。

【注意事项】

1、可疑菌落需同时接种在5ml的BHI肉汤中和营养琼脂上

Baird-Parker平板上或血平板上的可疑菌落需同时接种在5ml的BHI肉汤中和营养琼脂上，如果出现可疑菌在BHI肉汤出现生长状态不良，菌液浊度不够的情况，可用营养琼脂上的菌落重新接种BHI肉汤进行活化。

2、必须使用新鲜的BHI肉汤培养物

血浆凝固酶实验必须使用新鲜的BHI肉汤培养物。“新鲜”应理解为，培养物从培养箱取出后，立即进行试验。以保证培养物的酶活力良好。避免出现因取出一段时间后，因酶活力降低而引起的假阴性。

3、加入BHI肉汤培养物后，要轻轻转动瓶身至混合均匀

兔血浆中加入BHI肉汤培养物后，要轻轻转动瓶身至混合均匀，不要采取剧烈摇晃的方式。

4、试验应每半小时观察一次

不可直接观察第6h后的结果。一些金葡菌能够产生蛋白酶来分解纤维蛋白，而出现先凝集而后消融的情况，保证每半小时观察一次，防止因观察不及时，而误判成假阴性。观察凝固情况时，采用将西林瓶缓慢倾斜或倒置的方式。切记不要采用摇晃的方式进行观察！当凝固体积大于原体积一半，即可判为阳性。

结果判断：

编号

产品名称

结果判断

培养时间

备注

阳性

阴性

HB4117-4

兔冻干血浆

全凝或凝固体积大于一半

不凝固

2-6h

接种肉汤培养物0.3ml于安瓿瓶内，充分混合，

置36±1℃培养，定时观察是否有凝块形成。

血浆凝固酶实验操作视频：

不同细菌在冻干兔血浆上的生化反应：

冻干兔血浆微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养2-6小时。

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

一、适用范围

本标准（GB 4789.10-2010）适用于食品、药品及临床样本中金黄色葡萄球菌的定性检测，通过血浆凝固酶试验验证其致病性。检测对象为可形成游离凝固酶的菌株，需在36℃±1℃培养条件下完成实验[10]。

二、核心检测方法

采用血浆凝固酶试验：将待测菌株肉汤培养物与复溶冻干兔血浆混合，观察凝固现象。分为两种方法：
1. 生理盐水复溶后加入0.2ml-0.3ml菌液（GB方法）
2. 直接加入0.8ml菌液复溶（快速法）[2][10]。

三、检出限与定量限

本方法为定性检测，无明确定量要求。阳性结果判定标准为：6小时内出现血浆凝固现象，空白对照无生长。凝固酶阳性菌株检出特异性达100%[10]。

四、质控样品要求

1. 空白对照：需无菌生长
2. 阳性对照：使用标准金黄色葡萄球菌菌株（如ATCC 25923）
3. 样本处理：严格执行无菌操作，避免交叉污染[2][10]。

五、关键实验步骤

1. 冻干血浆复溶：按标准加入灭菌生理盐水或菌液
2. 混合培养：充分混匀后立即置于恒温培养箱
3. 结果观察：每30分钟观察一次，持续6小时
4. 结果验证：必要时通过乳胶凝集实验复核[2][10]。

六、特别说明

1. 冻干血浆需2-8℃避光保存，复溶后立即使用
2. 含0.25%氯化钙的血浆可提高凝固灵敏度
3. 非致病性葡萄球菌（如表皮葡萄球菌）需排除干扰
4. 实验环境湿度需≤80%[2][10]。

[参考编号] [2] 冻干草酸钾兔血浆使用说明书 [10] 冻干兔血浆在金黄色葡萄球菌检验中的应用研究

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