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TMP琼脂培养基/用于金黄色葡萄球菌的分离培养_
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TMP琼脂培养基/用于金黄色葡萄球菌的分离培养

HB4152 TMP Agar Medium {{goodObj.price > 0 ? '¥' + goodObj.price : '咨询'}} ¥{{goodObj.sell_price || 0}} 咨询 250g {{goodObj.date}} hopebio {{item.norm}} 见证书 {{inventory}}
TMP琼脂培养基介绍:

用途:用于金黄色葡萄球菌的分离培养。

添加剂:每瓶需配套添加1盒HB0123 1%亚碲酸钾溶液使用。

成分(g/L)

蛋白胨20.0
酵母浸粉5.0
氯化钠40.0
磷酸氢二钾5.0
甘露醇5.0
苯酚红0.025
琼脂15.0
pH值7.5±0.125℃

检验原理:

蛋白胨、酵母浸粉提供基本的营养;高浓度的氯化钠具有选择性,可抑制部分不耐盐细菌的生长;甘露醇为可发酵糖类;磷酸氢二钾为pH缓冲剂;苯酚红为酸碱指示剂;琼脂为凝固剂;较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长,并可被金黄色葡萄球菌还原,菌落呈黑色。金黄色葡萄球菌具有较强的耐盐性,可在此培养基中生长,并还原亚碲酸钾,菌落显黑色,同时可分解培养基中的甘露醇产酸,使培养基变黄。

用法:

称取本品90.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,加入无菌1%亚碲酸钾溶液15ml,混匀,倾入无菌平皿,备用。

金黄色葡萄球菌在TMP琼脂培养基上的生长特征:

黑色圆形凸起菌落,菌落周围变黄

TMP琼脂培养基微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置36±1℃需氧培养24-48小时。 注:回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。

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一、适用范围
TMP琼脂培养基主要用于食品、药品及环境样品中金黄色葡萄球菌的选择性分离培养,符合GB 4789.10-2016《食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》及SN/T 0172-2010《出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法》的适用范围要求[1][7]。该培养基通过显色反应区分目标菌与非目标菌,适用于定量和定性检测。
二、核心检测方法
依据GB 4789.10-2016,TMP琼脂采用倾注法或涂布法接种样品液,36℃培养18-24小时后,通过菌落形态和显色特征(如目标菌呈蓝色至紫色)进行初步鉴定,并通过配套生化试验确认[1][7]。SN/T 0172-2010要求对可疑菌落进行血浆凝固酶试验或核酸鉴定。
三、检出限与定量限
GB 4789.10-2016规定定量检测的检出限为1 CFU/g(mL),定量范围为30-200 CFU/平板;定性检测要求样品液中至少含1个目标菌[7]。SN/T 0172-2010要求定量限与GB标准一致,同时强调样品预处理需避免干扰物质影响检出率。
四、质控样品要求
实验需同步进行阳性对照(如ATCC 25923金黄色葡萄球菌)和阴性对照(如大肠埃希氏菌ATCC 25922),确保培养基选择性和显色特性符合GB 4789.10-2016要求[7]。每批次培养基需验证生长率(≥70%)和抑制率(非目标菌抑制≥80%)。
五、关键实验步骤
1. 样品制备:按标准方法制备1:10样品匀液;
2. 接种:取1mL样品液与45-50℃熔化的TMP琼脂混匀倾注平板,或直接涂布;
3. 培养:36℃±1℃倒置培养18-24小时;
4. 计数:选择含30-200个菌落的平板,按显色特征分类计数;
5. 确证:挑取典型菌落进行革兰氏染色、血浆凝固酶试验或分子生物学鉴定[1][7]。
六、特别说明
1. 培养基需避光保存于2-8℃,开封后需密封防潮;
2. 自制平板厚度需≥2mm(对应Φ90mm平板装量15-20mL);
3. 显色结果需在24小时内判读,避免色素扩散;
4. 实验人员需佩戴口罩操作,防止吸入培养基粉尘[1][7]。

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