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绿脓菌素测定培养基管(PDP)13ml/用于铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)的绿脓菌素测定试验_
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绿脓菌素测定培养基管(PDP)13ml/用于铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)的绿脓菌素测定试验

HBPT5187 {{goodObj.price > 0 ? '¥' + goodObj.price : '咨询'}} ¥{{goodObj.sell_price || 0}} 咨询 20支/盒 {{inventory}} {{goodObj.date}} hopebio {{item.norm}} 见证书

绿脓菌素测定培养基管(PDP)13ml介绍:

用途:用于铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)的绿脓菌素测定试验。

包装方式:玻璃管装13ml,螺旋口,单支独立包装,更防漏,免污染 

成分(g/L)

蛋白胨20.0
氯化镁1.4
硫酸钾10.0
琼脂18.0
pH值7.4± 0.125℃

检验原理:

蛋白胨和甘油提供碳氮源;氯化镁和硫酸钾促进绿脓色素和荧光素的产生;琼脂是培养基的凝固剂。

使用说明:

用接种针(环)挑取待测菌落,在PDP斜面上“之”字形划线接种,置于36±1℃培养24±2h或标准规定的条件下进行培养。培养结束后,向试管中加入3-5mL三氯甲烷,,充分振荡使培养物中的绿脓菌素溶解于三氯甲烷液内,待三氯甲烷提取液呈蓝色时,用吸管将三氯甲烷移到另一试管中并加入1mol/L的盐酸1mL左右,振荡后,静置片刻。如上层盐酸液内出现粉红色到紫红色时,即绿脓菌素试验结果为阳性。

绿脓菌素生成试验方法及原理:

方法:挑取可疑菌落接种在在绿脓菌素测定用培养基(PDP)斜面上,培养24小时,观察斜面有无色素。如有色素,在试管内加氯仿3.0~5.0mL,充分震摇,使培养物中的绿脓菌素提取在氯仿中,待氯仿提取液呈现绿色时,加1mol/L盐酸约1mL,震摇后静置片刻,上层盐酸溶液中呈现粉红至红色实验结果为阳性,否则为阴性。

原理:铜绿假单胞菌能产生的绿脓菌素能被氯仿提取,且在水中溶解度比氯仿大,并且会发生可逆的氧化还原反应,氧化时碱性呈蓝色,酸性呈红色。所以加入盐酸溶液并震摇后,绿脓菌素会由氯仿转移至盐酸溶液中,并在酸性环境中呈红色。

注意事项:

1.使用前应观察培养基外观是否正常,若出现试管破碎、培养基变色、干裂或污染等异常现象时,则不能使用。

2.本产品为保证产品的稳定性及无菌性,采用了密封的螺旋试管盖。在接种培养过程中,严禁拧紧试管盖,建议更换为透气的硅胶塞或者使用脱脂棉封口,保证良好的透气性。铜绿假单胞菌为严格需氧型细菌,密闭培养会导致绿脓菌素产生不足,出现假阴性结果。

3.使用三氯甲烷提取绿脓菌素时,通常浸泡5-10min即可,若效果不明显,也可延长浸泡时间或用玻璃棒捣碎培养基斜面后浸泡。

4.三氯甲烷为管制品,具有一定的危险性,且易挥发,提取绿脓菌素时应在通风橱操作,做好防护措施。同时由于三氯甲烷可溶解塑料,因此操作时应使用玻璃材质的吸管和试管对三氯甲烷进行转移和存放。

不同细菌在绿脓菌素测定用培养基管(PDP)中的生化反应:

绿脓菌素测定培养基管(PDP)微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基,接种以下质控菌株,放置35℃需氧培养24小时。

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以上信息仅供参考,请以实物批次为准!

一、适用范围

适用对象及领域 适用于绿脓杆菌(铜绿假单胞菌)的检测,特别是其产生的绿脓菌素定性分析,广泛用于药品、化妆品、食品及环境样本的微生物安全评估[1][4][6]。

二、核心检测方法

检测流程 1. 增菌培养:使用营养肉汤或mEC肉汤增菌(37℃, 18-24h);
2. 选择性分离:划线接种至PDP培养基或十六烷基三甲基溴化铵平板;
3. 生化鉴定:包括氧化酶试验、绿脓菌素测定、硝酸盐还原试验及42℃生长试验[4][7][8]。

三、检出限与定量限

灵敏度指标 检出限(LOD):1 CFU/g或mL(基于增菌后选择性分离法);
定量限(LOQ):与检出限一致,需通过阳性对照验证[4][8]。

四、质控样品要求

质控措施 1. 阳性对照:标准绿脓杆菌菌株(如ATCC 9027);
2. 阴性对照:非目标菌(如大肠杆菌);
3. 培养基质控:每批次需验证无菌性及促生长能力[3][8]。

五、关键实验步骤

操作要点 1. 培养基配制:按46.4g/L比例溶解干粉,添加10g甘油,分装后灭菌;
2. 绿脓菌素提取:菌落经氯仿萃取后加入盐酸观察显色反应;
3. 结果判读:紫红色为阳性,需结合其他生化试验综合判定[4][7][8]。

六、特别说明

注意事项 1. 废弃物处理:带菌物品需121℃高压灭菌30分钟;
2. 培养基保存:避光干燥存放,开封后需密封防潮;
3. 实验安全:操作人员需穿戴防护装备,实验室需符合生物安全二级(BSL-2)标准[3][4][6]。

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