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硝酸盐胨水培养基(中国药典)/用于硝酸盐还原产气试验

HB5220-2

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250g

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硝酸盐胨水培养基(中国药典)介绍：

用途:用于硝酸盐还原产气试验。

成分(g/L)

蛋白胨	10.0
酵母浸粉	3.0
硝酸钾	2.0
pH值7.3±0.1	25℃

硝酸盐还原产气试验方法及原理

方法：取可疑菌落接种在含小导管的硝酸盐蛋白胨水培养基内，35℃培养24小时，小导管内有气体产生实验结果为阳性，否则为阴性。

原理：硝酸盐胨水培养基主要用于硝酸盐还原实验。蛋白胨、酵母粉提供碳氮源、维生素和生长因子；硝酸钾为可利用的硝酸盐。铜绿假单胞菌是一类专性需氧菌、以有机碳作为能源的异养硝化菌，能通过产生的酶分四步还原硝酸盐，将硝酸盐分解产生氮气。

用法

称取本品15.0g,加热溶解于1000ml纯化水中,分装试管,并加入小倒管,121℃高压灭菌 15 分钟,备用。

硝酸盐胨水培养基微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置30-35℃需氧培养18-24小时。

不同细菌在硝酸盐蛋白胨水培养基上的生长特征

硝酸盐胨水培养基的使用原理及方法：

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中国药典通则 3605 细菌生化反应培养基

适用范围

用于细菌生化反应检测，包括硝酸盐还原试验，适用于绿脓杆菌等微生物的鉴别[1][2]。

核心检测方法

硝酸盐还原试验：通过检测细菌是否将硝酸盐还原为亚硝酸盐或氮气，结合显色反应（如对氨基苯磺酸与α-萘酚反应）或气体产生（小倒管观察）判断结果[2][5]。

检出限与定量限

未明确具体数值，但要求培养基灵敏度需通过标准菌株（如铜绿假单胞菌）验证，确保阳性反应显著可辨[1][2]。

质控样品要求

需使用CMCC（中国医学细菌保藏管理中心）、CICC（中国工业微生物菌种保藏管理中心）等权威机构提供的标准菌株进行质控[1][2]。

关键实验步骤

1. 培养基配制：称取15.5g干粉溶于1000ml蒸馏水，115℃高压灭菌20分钟，分装试管并加入小倒管。
2. 接种与培养：取可疑菌落接种，35℃培养24小时，观察小倒管内气体产生或显色反应[2][5]。

特别说明

1. 试验需设置阴性与阳性对照以确保准确性。
2. 若细菌进一步将亚硝酸盐转化为氮气，需结合气体产生与显色反应综合判定[2][5]。

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