半固体动力培养基/用于动力观察，菌种保存，H抗原位相变异试验_培养基_菌种_标准物质_萘析商城

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半固体动力培养基/用于动力观察，菌种保存，H抗原位相变异试验

HB4168-2

Motility Test Medium (Semisolid)

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250g

hopebio

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半固体动力培养基介绍：

用途：用于动力观察，菌种保存，H抗原位相变异试验。

成分(g/L)

蛋白胨	10.0
牛肉浸粉	3.0
琼脂	4.0
氯化钠	5.0
pH值7.4±0.1	25℃

检验原理：

蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素、矿物质；氯化钠维持均衡的渗透压；较少量的琼脂作为培养基的凝固剂。

用法：

称取本品22.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，煮沸溶解，分装小试管，121℃高压灭菌15分钟，直立凝固，备用。

此溶液相当于多价鞭毛抗原(H)鉴定中，0.3%-0.4%半固体琼脂的小玻管中的溶液（同GB008）。如需配置0.55%-0.65%半固体琼脂平板，需在每1000ml溶液中添加1.5-2.5g琼脂即可。

半固体动力培养基微生物质控结果：

半固体动力培养基微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36℃需氧培养18-24小时。

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HB4160a1	萘啶酮酸（5.0mg）Nalidixic Acid	5.0mg/支*5	添加于225ml李氏菌增菌肉汤
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HBPM4154	TSA-YE平板（9cm）TSA-YE Plate	9cm*10个/包	用于单增李斯特氏菌的分纯培养,也可用于做7%羊血琼脂
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标准名称及标准号

GB 4789.28-2013《食品安全国家标准食品微生物学检验培养基和试剂的质量要求》

适用范围

本标准适用于食品微生物检验中培养基和试剂的性能评价，包括半固体动力培养基的质量控制及适用性检查，确保其符合微生物生长、动力观察及抗原变异的实验要求。

核心检测方法

1. 培养基性能测试：通过接种标准菌株（如大肠埃希氏菌、沙门氏菌），观察半固体培养基中细菌动力（扩散生长）与非动力菌（线性生长）的差异。
2. H抗原位相变异试验：利用半固体培养基的低琼脂浓度特性，促进鞭毛抗原的相变表达，通过血清学方法验证抗原变异结果。

检出限与定量限

本标准未直接规定定量限，但要求培养基应支持目标菌株在24小时内形成可见动力带（扩散环），且阴性对照无扩散生长。

质控样品要求

1. 阳性对照：使用动力阳性菌株（如普通变形杆菌ATCC 13315）；
2. 阴性对照：使用动力阴性菌株（如志贺氏菌ATCC 12022）；
3. 质控频次：每批次新配制培养基需进行质控验证。

关键实验步骤

1. 穿刺接种：用接种针垂直穿刺至培养基底部，避免晃动；
2. 培养条件：35±1℃培养18-24小时，需保持湿度防止培养基干裂；
3. 结果判读：动力阳性菌在穿刺线周围呈云雾状扩散，阴性菌仅沿穿刺线生长。

特别说明

1. 培养基琼脂浓度需严格控制在0.3%-0.5%，过高抑制动力观察，过低无法形成稳定基质；
2. H抗原变异试验需结合血清学凝集试验，排除自凝现象干扰；
3. 长期保存菌种时需定期转种并检查动力特性是否丢失。

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