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CVT琼脂/用于乳制品中嗜冷菌计数

HB8556

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250g

hopebio

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CVT琼脂介绍：

用途：用于乳制品中嗜冷菌计数。

检验原理：

蛋白胨、酵母浸粉提供细菌生长所需的碳源、碳源及维生素，少量的葡萄糖可提供碳源促进细菌的快速生长，结晶紫可抑制一些非专性嗜冷的革兰氏阳性菌的生长，TTC为显色剂，细菌生长时可将TTC还原，菌落呈红色，琼脂为凝固剂。

用法：

称取本品23.5g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，冷至50℃左右倾入无菌平皿备用。

注意：用涂布法计数，在20-25℃培养48-72小时，计数显红色菌落。

小肠结肠炎耶尔森氏菌在CVT琼脂上的生长特征：

CVT琼脂微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置20-25℃需氧培养48-72小时。

注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。

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一、适用范围

CVT琼脂主要用于乳及乳制品中嗜低温细菌总数的测定，适用于食品微生物检测领域，相关标准包括《NY/T 1331-2007 乳与乳制品中嗜冷菌菌落总数的测定》和ISO标准方法。

二、核心检测方法

检测方法基于滤膜法（SN标准）或涂布法，通过培养基中结晶紫抑制非目标菌，TTC显色剂标记目标菌落，最终计数显红色菌落。

三、检出限与定量限

典型质控菌株（如小肠结肠炎耶尔森氏菌ATCC23715）的检出限为20-200 CFU，定量限需通过平行实验确定，通常与接种量和培养基灵敏度相关。

四、质控样品要求

需使用标准菌株（如ATCC23715）进行质控，接种量控制在20-200 CFU，菌落形态应为红色，且与对照培养基（如TSA琼脂）的回收率一致。

五、关键实验步骤

1. 配制：称取23.5g培养基溶解于1L蒸馏水中，调节pH至7.0±0.2。
2. 灭菌：121℃高压灭菌15分钟，冷却至50℃倾注平板。
3. 培养：样品涂布后于20-25℃培养48-72小时。

六、特别说明

1. 结晶紫可抑制革兰氏阳性菌，避免杂菌干扰。
2. TTC显色剂需避光保存，防止失效。
3. 培养温度严格控制在25℃以下，确保嗜冷菌特异性。

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