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结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）（颗粒）/用于大肠菌群的固体平板检测

HBKP0114

Violet Red Bile Agar

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250g

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结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）（颗粒）介绍：

用途：用于大肠菌群的固体平板检测。

成分(g/L)

蛋白胨	7.0
酵母粉	3.0
氯化钠	5.0
乳糖	10.0
胆盐	1.5
结晶紫	0.002
中性红	0.03
琼脂	15.0
pH值7.4 ± 0.1	25℃

检验原理：蛋白胨和酵母粉提供碳氮源和微量元素；乳糖是可发酵的糖类；氯化钠可维持均衡的渗透压；胆盐抑制革兰氏阳性菌，特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌；结晶紫对革兰氏阳性菌如葡萄球菌、白喉杆菌，以及绿脓杆菌、白念珠菌、表皮癣菌有杀灭作用，对其他革兰氏阴性菌和抗酸菌几乎无作用；中性红为pH 指示剂。

用法：

称取本品41.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸不要超过2分钟。取适宜稀释度样品液1ml,加入到无菌平皿中心,将冷至45±0.5℃的VRBA 10-15ml倾注于平皿中。小心旋转平皿将培养基与样液充分混匀。凝固后，再加3-4ml VRBA覆盖平板表层 ,翻转平板 ,置于36±1℃培养18-24小时。无需高压灭菌。临用时制备,不得超过3小时。

不同细菌在结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）上的生长特征：


大肠埃希氏菌紫红色菌落，可有胆盐沉淀环				弗氏柠檬酸杆菌紫红色菌落，可有胆盐沉淀环


阴沟肠杆菌紫红色菌落，可有胆盐沉淀环				鼠伤寒沙门氏菌粉红色菌落，无胆盐沉淀环

结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）颗粒的微生物灵敏度试验:

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养18-24小时。

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本公司销售的所有产品仅供实验科研使用，不用于人体及临床诊断。

国家标准 GB 4789.3-2008 与行业标准 SN 0169-92 解读

适用范围

适用于食品及水中大肠菌群的平板计数检测，特别是食品卫生安全监测领域[4][9]。

核心检测方法

采用倾注平板法：样品经梯度稀释后，与45℃ VRBA培养基混合，双层覆盖培养，通过典型菌落形态（紫红色带胆盐沉淀圈）进行计数[1][9]。

检出限与定量限

有效计数范围25-250CFU/平板，检测限为1CFU/g(mL)，定量限根据样品稀释梯度确定，常规检测采用10^-1至10^-3稀释度[4][9]。

质控样品要求

需同步进行阳性对照（大肠埃希氏菌ATCC 25922）和阴性对照（金黄色葡萄球菌ATCC 25923），阳性菌应形成典型菌落，阴性菌受抑制[4][5]。

关键实验步骤

1. 样品处理：25g样品+225mL缓冲液均质
2. 培养基配制：41.5g VRBA颗粒+1L水煮沸溶解（不高压灭菌）
3. 培养条件：36±1℃倒置培养18-24小时[1][4][9]

特别说明

1. 培养基煮沸后需在3小时内使用
2. 胆盐成分对革兰氏阳性菌具有选择性抑制
3. 显色原理：中性红指示剂在酸性环境下显红色，结晶紫抑制杂菌[4][5][10]

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阴沟肠杆菌紫红色菌落，可有胆盐沉淀环				鼠伤寒沙门氏菌粉红色菌落，无胆盐沉淀环