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EC肉汤（颗粒）/用于粪大肠菌群、大肠杆菌的测定

HBKP0105

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250g

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EC肉汤（颗粒）介绍：

用途：用于粪大肠菌群、大肠杆菌的测定。

成分(g/L)

胰蛋白胨	20.0
乳糖	5.0
氯化钠	5.0
磷酸氢二钾	4.0
磷酸二氢钾	1.5
3号胆盐	1.5
pH值6.9±0.2	25℃

检验原理：

胰蛋白胨提供碳氮源；3号胆盐抑制革兰氏阳性菌，特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪肠球菌；乳糖是可发酵的糖类；磷酸氢二钾和磷酸二氢钾为缓冲剂；氯化钠可维持均衡的渗透压。

用法：

称取本品37.0g，加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中，分装至有小倒管的试管中，每管10ml，121℃高压灭菌15分钟，备用。

质量控制和典型特征：

在44.5±0.2℃培养48±2h，粪大肠菌群和大肠杆菌产生气体，在倒立小发酵管中有气泡。

EC肉汤中不同细菌的生长情况：

EC肉汤（颗粒）微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置44.5±0.2℃需氧培养48±2小时。

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一、适用范围

EC肉汤适用于食品、水质等样品中粪大肠菌群和大肠杆菌的确证试验，依据国家标准GB 4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》和行业标准SN/T 0169-2010《进出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检测方法》。该培养基通过选择性抑制非目标菌，适用于多管发酵法的确证培养[1][3]。

二、核心检测方法

依据GB 4789.3-2016，采用多管发酵法：
1. 初发酵：样品接种于乳糖胆盐培养基，36℃培养24h；
2. 复发酵：阳性管转接EC肉汤，44.5±0.2℃培养24-48h；
3. 产气判读：小倒管中气体≥1/3体积为阳性。该方法可区分普通大肠菌群与耐热的粪大肠菌群[1][3]。

三、检出限与定量限

1. 多管发酵法：检出限3 MPN/g（按GB 4789.3规定）；
2. 定量限根据接种梯度确定，典型样品接种量梯度为0.1g、0.01g、0.001g；
3. 最低定量限为1 MPN/10g（SN/T 0169标准方法）[3][5]。

四、质控样品要求

1. 阳性对照：大肠埃希氏菌（CMCC 44102或ATCC 25922），应产气且混浊度≥2麦氏单位；
2. 阴性对照：粪肠球菌（ATCC 29212），培养后应无混浊及产气；
3. 空白对照：未接种培养基应保持澄清。质控频率每批次培养基至少验证一次（参照GB/T 27405-2008）[1][3]。

五、关键实验步骤

1. 配制：37g干粉溶解于1L蒸馏水，煮沸至完全溶解；
2. 分装：每支试管8-10ml，含杜氏小倒管；
3. 灭菌：121℃高压灭菌15min，冷却后4℃保存备用；
4. 接种：取初发酵阳性培养物1ml转种；
5. 培养：44.5±0.2℃水浴培养24±2h观察，阴性者继续培养至48h[1][3][5]。

六、特别说明

1. 温度控制：培养箱需校准，水浴培养需覆盖液面；
2. 干扰物质：高浓度抗生素或消毒剂残留可能导致假阴性；
3. 储存要求：开封后需密封防潮，有效期内结块不可使用；
4. 改良应用：检测O157:H7时需添加新生霉素（参考GB 4789.36标准）[3][5][9]。

[1] EC肉汤瓶装颗粒培养基-广东环凯生物科技有限公司 [3] EC肉汤培养基配制方法与实验步骤-丁香通 [5] EC肉汤具体是做什么实验用的 [9] EC肉汤-百科

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